草原黑蘑原生质体紫外线诱变再生菌株的研究

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草原黑蘑是近年从一种野生食用真菌驯化来的一个新型食用菌,其富含人体所需的蛋白质、维生素、氨基酸、碳水化合物等营养成分及钙、磷、铁、锌等多种微量元素,是营养美味的菜品佳肴,具有极高的食用价值、营养价值和药用价值。草原黑蘑对外界环境条件反应较敏感,在自然条件下生长速度慢。为了给人工栽培提供好的菌种,我们以草原黑蘑原生质体为起始材料进行紫外线诱变,以期提高草原黑蘑菌丝体的生长速度,为获得更高产量和营养价值的草原黑蘑提供依据。本实验主要结论如下:1.以hm8124-1和hm910两个菌株液体摇培8天的菌丝体为材料,溶壁酶浓度为1.4%,25℃酶解4 h,可以制备足够的草原黑蘑原生质体。2.对hm8124-1和hm910两个菌株草原黑蘑原生质体进行不同时间的紫外线照射,随着紫外线照射时间的延长致死率也会增大,随着距紫外灯的距离增大致死率会变小。致死率跟诱变时间成正比,跟诱变距离成反比。3.诱变后挑取长势快而强壮的单个菌落,进行菌丝体生长速度,胞外酶活性测定,从再生菌株中选到生长速度快于起始的材料,同时再生菌株的漆酶和蛋白酶活性发生了变化,得到的突变菌株酶活力升降趋势均不同于对照组。4.再生菌丝体经过ISSR分析,发现诱变后的菌株与对照菌株PCR产物电泳图有明显的差异,说明DNA序列发生了变化。
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