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前言蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage SAH)发生率在西方国家约10人／10万人,脑血管痉挛和早期脑损伤是患者致死和致残的主要原因,约12.4%患者在入院前已发生猝死,出血48小时内的死亡率高达40%-60%,约35%在SAH后24小时内死亡。患者致死、致残的主要原因是出血后的脑血管痉挛(cerebral vasospasm, CVS)和早期脑损伤(early brain injury, EBI)。早期脑损伤病理生理学包括血脑屏障(BBB)的破坏、脑水肿及神经细胞凋亡,凋亡受到多种相关基因的调控,这些基因已经被证实在早期脑损伤和迟发性血管痉挛血管壁和脑组织中存在表达。P53和Bcl-2则被认为是抑制和促进细胞凋亡最重要的基因。延缓或阻止凋亡的发生和发展,有望为脑血管痉挛和早期脑损伤防治找到一条新的途径。本研究采用血管内穿刺法建立大鼠蛛网膜下腔出血动物模型,探讨P53和Bcl-2在在大鼠SAH后早期脑损伤中的表达及意义。材料和方法按文献所述,建立标准大鼠血管内线穿刺法SAH动物模型。健康成年SD大鼠144只(体重300-350mg,雄性),取24只随机分为假手术组、SAH组和SP600125(30mg/kg组),每组8只,为SAH后12小时处理组。另外120只随机分为6组：对照组(n=20),假手术组(n=20),SAH组(n= 20), SAH+DMSO组(n= 20), SAH+10mg/kg(SP600125)(n= 20)和S AH+30mg/kg (SP600125) (n= 20)。SP600125(JNK抑制剂)溶解于DMSO溶液中,分别于制备蛛网膜下腔出血动物模型前1小时和蛛网膜下腔出血后6小时腹腔注射。同样剂量的DMSO(不含抑制剂)腹腔注射SAH组作为SAH+DMSO组。免疫组织化学方法检测鼠脑皮层和海马区P53、Bcl-2蛋白的表达。结果1、P53在大脑皮质和海马的阳性表达为细胞核呈棕黄色或棕褐色颗粒粒,伴有少量胞浆表达。正常组同假手术组比较无统计学意义(P>0.05)；SAH组和SAH+DMSO组同对照组比较有显著统计学差异(P<0.01)；SAH组同SAH+DMSO组比较无统计学意义(P>0.05)。SAH组不同时点(12h和24h)P53的表达有统计学意义(P<0.05)。SP600125(30mg/kg)组P53表达下降(P<0.01)。2、Bcl-2在大脑皮质和海马的阳性表达为,胞浆内出现棕黄色或棕褐色颗粒。其在正常脑皮质和海马均有一定程度的表达。正常对照组和假手术组比较无统计学意义(P>0.05)；SAH组中较对照组和假手术组Bcl-2表达明显减少(P<0.01)；SAH组、SAH+DMSO组和SP600125(10mg/kg)组比较无统计学意义(P>0.05)；SAH组不同时点(12h和24h)Bcl-2的表达有统计学意义(P<0.05)；SP600125(30mg/kg)组Bcl-2表达升高(P<0.01)。3、JNK抑制剂SP600125可改善蛛网膜下腔出血存活大鼠24小时后神经行为功能缺损；Sham组无死亡,SAH组、SAH+DMSO组、SAH+SP600125(10mg/kg)、SAH+SP600125(30mg/kg)死亡率分别为30%、35%、25%、15%,组间比较无统计学意义(x2 test,P>0.05)。结论SP600125可能通过影响P53和Bcl-2蛋白表达对SAH后早期脑损伤起保护作用。