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目的：利用RNA干扰技术,筛选出高效抑制T淋巴细胞白血病细胞株(Molt-4) BCL11B (B-cell chronic lymphocytic leukemia/lymphoma 11B)基因表达,抑制肿瘤细胞增殖和诱导凋亡的小干扰RNA (BCL11B-siRNA),并初步分析其作用相关分子机制。方法：(1)化学合成BCL11B-siRNA1,2,3,转染Molt-4细胞,并设无关序列的SC对照组,转染条件对照组(MOCK)和空白对照组(NC)；荧光实时定量PCR检测各组BCL11B mRNA的表达水平；SDS-PAGE和Western blot、化学发光法检测各组BCL11B蛋白的表达情况。CCK-8法观察各组Molt-4细胞体外增殖的抑制情况；流式细胞术(Annexin V/PI)及Hoechst33258染色检测凋亡。高分辨率活细胞成像系统动态监测BCL11B-siRNA3组Molt-4细胞的变化。(2) Affymetrix U133 plus2.0基因表达谱芯片检测BCL11B-siRNA3和各对照组。荧光实时定量PCR验证部分差异表达基因。流式细胞术检测BCL11B-siRNA3和各对照组BCL-2蛋白的变化。(3)免疫磁珠分选法(MACs)分选3例脐血CD34+细胞,流式细胞术鉴定纯度,荧光实时定量PCR检测BCL11BmRNA的表达水平。甲基纤维素半固体培养法分析BCL11B-siRNA3处理CD34+细胞形成红细胞集落形成单位(BFU-E)、粒-巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)和巨核细胞集落形成单位(CFU-Meg)的情况。结果：(1) BCL11B-siRNA3 (935)组沉默效果最佳,BCL11B-siRNAl (434)组次之。BCL11B mRNA表达水平：24h BCL11B-siRNA3组下调3～8倍,48hBCL11B-siRNA1下调2-6倍。BCL11B蛋白抑制率(与SC对照组比较)：48hBCL11B-siRNA3组54.08%,72h BCL11B-siRNA1组41.73%。72hBCL11B-siRNA3和BCL11B-siRNA1组Molt-4细胞的增殖率均显著降低(P<0.05)。BCL11B-siRNA3组Molt-4细胞凋亡明显,72h凋亡率为58.71±2.93%(P<0.05); Hoechst染色符合凋亡的形态学变化；高分辨成像系统动态监测到凋亡的过程。筛选出高效和稳定的2条siRNA序列,已申报专利。(2)全基因组表达谱芯片：BCL11B-siRNA3组142个基因上调,109个基因下调；参与信号通路的差异表达基因主要涉及凋亡相关信号通路(TNFSF10、BIK、BNIP3、BCL2L1)和转化生长因子p信号通路(SPP1、CREBBP)。经验证,TNFSF10、BCL2L1、SPP1基因的变化趋势符合芯片结果。72h BCL11B-siRNA3组BCL-2蛋白的表达明显低于各对照组。(3)脐血CD34+细胞分选纯度为97.17±1.45%,其BCL11B mRNA表达水平显著低于正常人外周血单个核细胞及Molt-4细胞(P<0.05)。BCL11B-siRNA3作用后,CD34+细胞体外BFU-E、CFU-GM、CFU-Meg的形成与MOCK对照组比较无显著性差异(P>0.05)。结论：RNA干扰下调Molt-4细胞BCL11B基因表达,可明显抑制Molt-4细胞增殖和促发凋亡；凋亡的发生与线粒体通路BCL-2家族多个基因及死亡受体信号通路TNFSF10基因的变化密切相关。BCL11B-siRNA对脐血CD34+细胞的体外增殖和分化无显著影响,初步说明其安全性。下调BCL11B基因可能作为针对T细胞肿瘤的一个新的靶向治疗策略。