论文部分内容阅读
目的观察280nm LED-紫外线(Light Emitting Diode-Ultraviolet, LED-UV)对HL-60细胞增殖的影响并研究其发生机制。方法取对数生长期的急性早幼粒白血病细胞标准细胞株(HL-60)作为研究对象,280nm LED-UV作为光源,实验分为A-E五组(对照组A及实验组B-E),分别以OJ/m2、8J/m2、15J/m2、30J/m2、60J/m2的剂量照射细胞,随后将各组细胞置于含10%胎牛血清的IMDM培养液、37℃、5%CO2、饱和湿度的条件下培养2小时。倒置显微镜下观察细胞生长情况及形态变化,CCK-8检测细胞增殖抑制率,荧光定量PCR检测Bcl-2基因的表达量,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡,PI染色流式细胞术检测细胞周期分布。结果1.HL-60细胞生长及形态变化：对照组细胞形态完整、圆形透亮、排列整齐、密度较大。实验组随着LED-UV剂量的增大,细胞皱缩、透亮度降低、排列紊乱、密度减少。E组可见大量崩解破碎的细胞。2.HL-60细胞增殖抑制率：实验组细胞增殖抑制率的比较差异有统计学意义(F=1297.68,P<0.01),且随着LED-UV剂量的增大,细胞增殖抑制率逐渐升高,各组间比较差异有统计学意义(P值均<0.01)。3.HL-60细胞Bcl-2基因的表达量：实验组Bcl-2基因表达量的比较差异有统计学意义(F=54.34,P<0.01)。B-D组随着LED-UV剂量的增大,Bcl-2基因的表达量逐渐降低,各组间比较差异有统计学意义(P值均<0.01)；而E组Bcl-2基因的表达量明显高于D组(P<0.01)。4.HL-60细胞凋亡率：各组细胞凋亡率的比较差异有统计学意义(F=293.50,P<0.01)。A-D组随着LED-UV剂量的增大,细胞凋亡率逐渐升高,各组间比较差异有统计学意义((P均<0.01)；而E组细胞凋亡率明显低于D组(P<0.01)。5.HL-60细胞周期分布：各组GO/G1期细胞比例的比较差异有统计学意义(F=173.44,P<0.01)。A-D组随着LED-UV剂量的增大,GO/G1期细胞比例逐渐升高,各组间比较差异有统计学意义(P均<0.05)；而E组GO/G1期细胞比例明显低于D组(P<O.01)。结论1.280nm LED-UV能抑制HL-60细胞Bcl-2基因的表达,在8-30J/m2剂量范围内呈剂量依赖性,剂量为30J/m2时抑制作用最强,60J/m2时抑制作用明显降低。2.280nm LED-UV能诱导HL-60细胞凋亡,在0-30J/m2剂量范围内呈剂量依赖性,剂量为30J/m2时凋亡率最高,60J/m2时凋亡率明显降低。3.280nm LED-UV能使HL-60细胞周期阻滞于GO/G1期,在0-30J／m2剂量范围内呈剂量依赖性,剂量为30J/m2时阻滞作用最强,60J/m2时阻滞作用明显降低。4.280nm LED-UV对HL-60细胞有增殖抑制作用并呈剂量依赖性。剂量在0-30J/m2范围内以诱导凋亡为主,其机制为抑制Bcl-2基因的表达、阻滞细胞周期于GO/G1期；剂量为60J/m12时以促进坏死为主。