高氧诱导小鼠视网膜新生血管过程中不同细胞因子mRNA表达水平的检测

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目的研究高氧诱导小鼠视网膜新生血管发生过程中血管内皮生长因子(VEGF),成纤维细胞生长因子(bFGF),内皮抑素(ET)和乙酰肝素酶(HPA)在视网膜中的表达。方法实验组将21只新生7天幼鼠放于体积分数约75%的高氧环境中饲养5天,再置于正常环境中饲养。另外21只新生幼鼠在正常环境中饲养作为正常对照组。分别在小鼠出生后第12、17、25天通过高分子量荧光素血管造影观察视网膜血管形态变化。并取小鼠视网膜,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测不同时间点视网膜组织中VEGF, bFGF, ET, HPA mRNA水平的变化,比较高氧组与对照组的差异。结果高氧组小鼠在生后12天时主要表现为后级部大片无灌注区,视网膜血管管径变细,分支减少,仅在周边部网膜形成少量血管网,正常对照组血管分布均匀,走形正常;而在生后17天时,高氧组小鼠血管走形迂曲紊乱,可见大量新生血管存在,对照组血管则均匀分布于整个视网膜;生后25天时高氧组血管分布较前均匀,但仍存在一定量的新生血管。另外生后3个不同时间点高氧组VEGF、bFGF和HPA mRNA表达水平逐渐增高,与对照组比较差异有统计学意义(F=113.608,P=0.000,F=59.235,P=0.OOO,F=188.493,P=0.000)。而ETmRNA表达水平逐渐降低,与对照组比较差异有统计学意义(F=32.365,P=0.000)。结论应用75%浓度的高氧可成功诱导小鼠视网膜新生血管形成,在新生血管形成过程中VEGF、bFGF、HPA作为进视网膜新生血管生长的重要因子,其mRNA表达水平升高;而ET作为抑制视网膜新生血管生长的细胞因子,其mRNA表达水平降低。
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