土壤中高效农药降解菌的分离和鉴定

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生物降解是农药分解代谢的重要环境过程之一,微生物、哺乳动物、水生生物、昆虫及植物等对农药的代谢都具有不可替代的作用,其中微生物降解尤为重要。相对于传统的物理、化学方法,微生物降解法是一个新的农药降解途径,其优势在于投入低、无毒、无残留、无二次污染,治理效果也相对明显,是目前公认的一种低成本且环境友好型去除污染物的方法。本文从不同作物田的土壤中分离获得114株降解菌,对通过测定其对吡虫啉的降解能力进行了进一步筛选,根据作物田农药使用史及所分离的细菌数量和农药降解降解能力进行了分析,评价了不同作物田土壤中农药使用对微生物的影响。选取降解能力最强的一株高效降解菌进行了生物化学与基因序列鉴定,并对该菌的最适生长条件、降解谱和对不同抗生素的敏感性进行了初步研究,主要研究结果如下:1.从山东省及北京市采集的28种不同作物土壤中分离获得114株不同种类农药降解菌,并通过测定菌株对吡虫啉的降解能力进行了筛选和农药使用对土壤中微生物影响的评价。农药使用量和使用频率大大影响了土壤中细菌的分布,并有可能定向改变微生物对农药的降解能力。2.所分离菌株中,对吡虫啉降解率在0-10%的有26株,在10-25%之间的78株,25%以上的10株。其中潍坊地区大姜地分离出的高效降解菌株1-2-4对吡虫啉降解能力达到了41.60%。选此高效降解菌株进行鉴定和特性分析。3.通过生物化学和基因序列的鉴定后将菌株1-2-4命名为不动杆菌属(Acinetobacter sp.) strain ZX01。此菌株为需氧的、不移动的、无孢子生成的革兰氏阴性菌。该降解菌对过氧化氢酶呈阳性反应,但对氧化酶和脲酶呈阴性反应。该细菌还可以利用葡糖糖、蔗糖、密二糖、阿拉伯糖和柠檬酸钠生长但是不能利用甘露糖、纤维糖、山梨糖醇、鼠李糖和苦杏仁苷生长。4.电子扫描显微镜扫描结果显示菌株ZX0l属于球杆菌,菌直径为0.7-0.9μm之间。此外,降解菌的最适生长条件为pH7-8、温度33℃,在正常环境范围之内,在环境中具有良好的应用潜质。5.高效降解菌的生长与灭蝇胺的降解呈正相关的关系,随着细菌数量的增长,培养基中的灭蝇胺被逐渐降解,在60h内,降解菌生长至稳定期,并能够几乎完全降解100g/mL灭蝇胺。此外,高效降解菌株ZX01对多种农药具有非常好的降解效果,降解谱很广,其中对八种农药降解效果达到了70%以上,可有效去除环境中同时残留的多种农药。6.通过纸片扩散法初步研究了该菌株对8种抗生素的敏感性,在30g/disk、10g/disk和6g/disk浓度下的不同种类抗生素实验中,菌株显示了不同程度的敏感性,其中菌株对四环素在三个浓度下都有很高的敏感性,可以有效控制环境中该菌株的细菌性感染和耐药性的生成。
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