【摘 要】
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目的:目前,国内外实验研究用SLC均来自杆状病毒表达产品,中国已有在大肠杆菌融合表达SLC的报道,由于目前还没有杆状病毒表达产品上市供人使用,且融合蛋白也不可用于人体等原
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目的:目前,国内外实验研究用SLC均来自杆状病毒表达产品,中国已有在大肠杆菌融合表达SLC的报道,由于目前还没有杆状病毒表达产品上市供人使用,且融合蛋白也不可用于人体等原因,我们试图通过高效表达载体pBV220实现SLC在大肠杆菌内非融合表达,用于SLC的生物学作用的研究.结论:1.成功克隆了人成熟SLC基因,序列分析显示,克隆的基因序列和文献报道一致.2.构建了成熟SLC的原核表达载体,获得稳定表达的工程菌株,重组蛋白约占菌体总蛋白的20﹪.3.初步摸索优化了重组SLC的表达条件,包含体提取步骤,初步纯化工艺.4.成功克隆了小鼠SLC基因,序列分析与Nakano,H报道的亮氨酸突变体一致.构建了分泌型表达载体,并实现了瞬时表达.5.成功完成小鼠黑色素瘤细胞系(B16)的基因修饰,修饰后的肿瘤细胞致瘤性下降,小鼠存活率延长.
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