【摘 要】
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背景:随着现代生物医学技术、临床外科技术、微创技术等的发展,肝癌的诊治水平得以进步,但疗效仍欠理想,有待提高。目前应用于肝癌治疗的新的药物不断涌现,但确切疗效仍待证
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背景:随着现代生物医学技术、临床外科技术、微创技术等的发展,肝癌的诊治水平得以进步,但疗效仍欠理想,有待提高。目前应用于肝癌治疗的新的药物不断涌现,但确切疗效仍待证实。进一步研究肝癌发病机制及发掘新的安全有效的治疗药物将为其改善与提高治疗效果带来新的希望。许多临床研究显示,中医药在提高肿瘤患者生存质量和延长生存时间等方面具有明显优势。
目的:本课题旨在研究中医扶正治法对SMMC-7721和Hepa1-6肝癌细胞的体内外抗癌作用;从细胞周期与细胞凋亡调控等方面揭示扶正抗癌的作用机制;为采用温阳、益气、滋阴各中医扶正与中西结合治疗肝癌提供理论与实验依据,为肝癌的防治开辟新的研究领域。
方法:运用细胞培养技术,采用现代药理学方法,MTT法,整体小鼠移植瘤实验等从整体及细胞水平评价不同扶正治法,温阳、滋阴、益气法对肝癌细胞增殖的抑制作用。并采用流式细胞术(FCM)检测细胞周期变化,从细胞周期角度观察中医扶正治法对肝癌细胞周期的影响。
结果:体外研究提示(1)中医扶正治法对肝癌细胞具有不同程度的抑制作用,且这种抑制作用在一定范围内呈浓度依赖性,与空白组比较在50mg/ml浓度以上有统计学意义(P<0.05)(2)温阳法对两种肝癌细胞的抑制作用具有优势,对Hepa1-6肝癌细胞的抑制作用在50mg/ml以上达到平台。(3)各法均能阻滞细胞周期于G2/M期。荷瘤实验提示(1)中医温阳、益气、养阴法皆能抑制小鼠肝癌实体瘤生长,其抑制率皆大于30%,并具有统计学意义(P<0.05)。(2)中医温阳、益气、养阴法对免疫器官具有保护作用,脾脏指数与胸腺指数明显上升,与化疗组相比有显著差异(P<0.05),温阳法和养阴法分别与化疗联合,脾脏指数与胸腺指数明显上升,与单纯化疗组比较有显著差异(P<0.05)。(3)病理形态学观察发现,与空白组相比经扶正中药处理后瘤细胞排列较规则,异型性和瘤巨细胞减少,并形成纤维包裹;与化疗组相比坏死较不明显。(4)温阳法和益气法可以通过G0/G1期阻滞诱导细胞凋亡,养阴法引起G2/M期阻滞但无明显诱导凋亡;三法与化疗(顺铂)联合后,可改变细胞周期阻滞,温阳法联合化疗出现S期阻滞,养阴法联合化疗引起G0/G1期阻滞,益气法联合化疗引起G2/M期阻滞。
结论:中医扶正治法在体内和体外对肝癌部有抑制作用。在细胞实验中温阳法的对SMMC-7721和Hepa1-6两种肝癌细胞抑制作用均表现出明显优势。在荷瘤实验中温阳、益气、养阴治法都体现了免疫保护作用,降低肿瘤的恶性程度的作用;对细胞周期的影响在体内和体外截然不同;不同扶正治法与化疗联合后对细胞周期的影响会发生改变;周期阻滞在一定条件下会诱导凋亡。
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