活化巨噬细胞后真菌性角膜炎中iNOs MIF MPO的表达

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目的观察巨噬细胞活化后小鼠真菌性角膜炎的发生发展及其角膜中前炎性因子iNOs、MIF、MPO的表达水平,探讨机体免疫在小鼠真菌性角膜炎中的作用。方法72只Balb/c小鼠随机分成三组,一组为实验组,另一组为对照组及空白对照组;实验组中,小鼠右眼感染真菌前7天于角膜浅基质层内注入乳胶微粒建立Balb/c小鼠茄病镰刀菌性角膜炎模型;对照组则注射入PBS液建立Balb/c小鼠茄病镰刀菌性角膜炎模型;空白组为正常对照组。在感染后第1、3、5、7天,将实验组及对照组于裂隙灯显微镜下观察角膜炎特点:HE染色观察角膜病理变化;Real time PCR检测角膜中细胞因子MIF、MPO、iNOS的表达。结果1.实验组,早期角膜浸润浑浊且进行性加重,第7天时达最严重,角膜浸润至深基质层及全角膜面,部分出现溃疡穿孔;对照组,早期角膜浸润浑浊表现较实验组轻微,角膜表层局部有炎性浸润混浊,角膜溃疡穿孔率较低;第5天后角膜表面基本无浸润溃疡表现。2.HE染色实验组可见早期角膜中央大量炎症细胞浸润,至第7天时炎症细胞及基质细胞浸润达最重。对照组可见早期角膜缘、角膜基质前房中有炎症细胞浸润,第5天后明显减少,基质纤维细胞逐渐增多。Real time-PCR检测结果表明,MPO、MIF、iNOs细胞因子基因mRNA在角膜接种菌液后实验组与对照组均出现表达,且实验组的表达显著强于对照组的表达。接种真菌后1天,实验组的细胞因子MIF、MPO、iNOs浓度较对照组低(P<0.05),接种真菌后3、5、7天,实验组细胞因子:MIF、MPO、iNOs,MIF浓度继续升高,且实验组均高于对照组;接种真菌后7天,实验组的MIF、MPO、iNOs浓度达到顶峰(P<0.05),而对照组的MIF、MPO、iNOs细胞因子较第5天开始下降。结论活化巨噬细胞后,MPO、MIF、iNOs等细胞因子在真菌性角膜炎中的表达增强,并在真菌性角膜炎的病理生理中起重要作用。
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