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【背景】肿瘤细胞的多药耐药（MDR）是临床上癌症化疗失败的主要因素之一。MDR的分子机制非常复杂，主要有由P-糖蛋白（MDR1/P-gp）、多药耐药相关蛋白（MRP）、乳腺癌耐药蛋白（BCRP）和肺耐药相关蛋白（LRP）等转运蛋白介导的MDR，由谷胱甘肽-S-转移酶（GST）、拓扑异构酶II（Topo II）和蛋白激酶C（PKC）等酶类介导的MDR，和由凋亡相关基因介导的MDR。HDAC1是一种组蛋白去乙酰化酶，能够催化组蛋白去乙酰化，在染色体的结构修饰和基因的表达调控方面发挥着重要作用。它与肿瘤的发生密切相关，在多数肿瘤细胞中高表达；研究表明HDAC1在卵巢癌耐受顺铂细胞（SKOV3/DDP）中也呈现高表达。HDAC1是否参与了卵巢癌的MDR，沉默HDAC1基因能否增强SKOV3/DDP细胞对DDP的敏感性，能否改变MDR1、Bcl-2及Bax这些MDR有关基因的表达，我们带着这些问题进行了本课题研究。本实验分三部分，目的、方法及结果分别如下：第一部分SKOV3/DDP细胞株耐药性的检测【目的】鉴定SKOV3/DDP细胞对顺铂的耐受性，判断能否以该细胞为卵巢癌耐药细胞模型进行肿瘤耐药逆转方面的研究。【方法】光镜下观察SKOV3细胞（DDP敏感株）和SKOV3/DDP细胞（DDP耐受株）的细胞形态差异，观察不同浓度的DDP对SKOV3细胞及SKOV3/DDP细胞生长的影响；MTT法检测不同浓度的DDP对两细胞生长的增殖抑制率，计算SKOV3/DDP细胞的耐药指数。【结果】 SKOV3细胞和SKOV3/DDP细胞的形态学差异明显，对DDP具有不同的耐受性，SKOV3/DDP细胞耐受DDP的耐药指数为3.15。确立了以SKOV3/DDP细胞为卵巢癌耐药细胞模型进行肿瘤耐药逆转方面的研究；第二部分shRNAHDAC1重组质粒干扰效率的鉴定【目的】鉴定公司合成后的重组质粒，筛选出对SKOV3/DDP细胞中HDAC1基因干扰效率较高的质粒用于后续实验。【方法】选择两段干扰HDAC1mRNA的靶序列，委托公司合成重组质粒，分别命名为重组质粒shRNA HDAC1-1和shRNA HDAC1-2，同时设立阴性对照质粒shRNA control；对重组质粒进行酶切及测序鉴定；将重组质粒利用脂质体转染法导入SKOV3/DDP细胞中，提取总RNA进行RT-PCR检测各组HDAC1mRNA的表达量。【结果】重组质粒酶切及测序鉴定结果符合设计要求；转染质粒shRNAHDAC1-2后SKOV3/DDP细胞中HDAC1mRNA相对表达量为（0.32±0.09），较转染质粒shRNA HDAC1-1后表达水平（0.45±0.39）低（P＜0.05）；确立了以干扰效率较高的shRNAHDAC1-2质粒用于沉默HDAC1的实验研究。第三部分shRNA重组质粒沉默HDAC1对SKOV3/DDP细胞的影响【目的】检测shRNA重组质粒沉默HDAC1对SKOV3/DDP细胞的影响【方法】 SKOV3/DDP细胞转染重组质粒后，Real-time PCR法检测耐药有关基因MDR1、Bcl-2和Bax mRNA的表达水平；流式细胞术检测对细胞凋亡的影响；MTT法检测SKOV3/DDP细胞对DDP敏感性的改变。【结果】 SKOV3/DDP细胞转染重组质粒后，MDR1mRNA表达水平显著降低（P＜0.01），Bcl-2mRNA表达水平较正常组（P＜0.05）和阴性质粒对照组（P＜0.01）均降低，Bax mRNA表达水平没有显著变化（P＞0.05）；凋亡细胞和坏死细胞增多；且增强了对DDP的敏感性，细胞耐药指数降至2.04。【结论】1、shRNA沉默HDAC1基因后增强了SKOV3/DDP细胞对顺铂的敏感性，可能与耐药相关基因MDR1mRNA水平降低相关，提示HDAC1可能是逆转卵巢癌多药耐药的重要靶点；2、shRNA沉默HDAC1基因后诱导SKOV3/DDP细胞发生凋亡，可能与凋亡抑制基因Bcl-2mRNA水平降低相关。