清瘟解毒口服液是近几年在家禽疾病防控中最常用的一种中兽药复方制剂,其功效为清热解毒,主治家禽外感发热。但其传统生产工艺存在药材有效成分提取率偏低、除杂浓缩环节损失高和能耗高等缺陷。同时,清瘟解毒口服液的国家质量标准中均为定性鉴别,缺乏该方剂主要药效成分的定量检测,影响了产品质量稳定性的控制,可能导致产品临床疗效的较大差异。针对上述问题,本课题建立了清瘟解毒口服液重要成份黄芩苷的高效液相检测方法,一定程度上完善了国家标准。通过研究生物酶解、膜分离等高新制备工艺,提高该药品活性成分收率,降低资源损耗,节约生产成本,并通过对制备工艺的改进,提升清瘟解毒口服液的质量和性价比。本课题的具体研究结果如下:(1)黄芩苷液相色谱检测方法的建立本课题在《兽药国家标准汇编---兽药地方标准上升国家标准》中清瘟解毒口服液原质量标准的基础建立了黄芩苷液相色谱检测方法。研究结果显示:黄芩苷高效液相色谱检测中供试品的制备方法是:取药液1mL,置50mL容量瓶中,加入适量50%甲醇溶液,超声处理20min(100W,40KHz),放置至室温,用50%甲醇溶液定容至刻度,摇匀,用微孔滤膜(0.45μm)滤过。色谱条件为:以Kromasil C18(250mm*4.6mm,5μm)为色谱柱,以十八烷基硅烷键合硅胶(C18)作为填充剂,流动相为乙腈:0.2%磷酸溶液(22:78)。检测波长为274nm,流速为1.OmL/min,柱温为40℃,进样量为10μL。研究表明:该方法精密度、准确性、重复性好,且加样回收率高,可作为黄芩苷定量测定方法。(2)清瘟解毒口服液粉碎提取参数通过对清瘟解毒口服液组方药材进行粉碎预处理工艺研究,综合比较不同粉碎提取参数对药液活性成分收率的影响,证明破碎提取工艺的最优技术参数为:药材粉碎过24目筛,提取时间为50min,提取温度为90℃,加水量为药材的8倍量水。(3)清瘟解毒口服液酶解破壁工艺参数利用生物酶特有的高效性及专一性特点,并根据清瘟解毒口服液的组方药味特点,选择纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、淀粉酶组成的复合酶,筛选出了最适酶用量及最佳酶反应条件。研究结果表明,生物酶解破壁提取工艺的最优技术参数为:复合酶最佳作用剂量为0.1%,纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、淀粉酶比例为1:1:2.5:2,pH4.5,反应时间50min,反应温度为45℃。(4)清瘟解毒口服液膜过滤除杂工艺参数利用陶瓷膜对中药提取液流体的选择性分离,通过对影响过滤速度的主要因素中膜孔径、温度及压力参数进行研究,使活性物质选择性通过,从而达到除杂目的。研究结果表明,清瘟解毒口服液膜过滤除杂工艺的最佳技术参数为:陶瓷膜孔径为0.6μm,药液温度为30℃、压力为0.2MPa。。(5)清瘟解毒口服液膜浓缩工艺参数选择膜浓缩技术在较低温度下进行清瘟解毒口服液的浓缩,通过对压力、温度、相应膜通量及膜污染等参数设计不同对照及正交实验,研究结果显示:在膜浓缩操作压力0.2MPa、过滤药液温度40℃、进料药液流速为35.67m/s的条件下,进行清瘟解毒口服液的浓缩,可使蒸汽的利用率较传统工艺显著提高。(6)清瘟解毒口服液新工艺中试生产通过对清瘟解毒口服液提取、除杂、浓缩等工艺流程的研究,将上述提取、除杂、浓缩方法联合应用于清瘟解毒口服液的制备,并通过放大生产对实验室所筛选的技术参数进行再验证。结果显示:在采用新型联动工艺进行中试生产过程中,清瘟解毒口服液的活性成分收率显著提高;成品经6个月的加速试验,其性状、鉴别、含量、微生物限度等各项指标均合格,表明在新工艺条件下产品质量稳定。本研究新工艺中试产品经河南省兽药监察所检验完全合格。相关研究成果被评为郑州市科技进步二等奖并申请国家发明专利授权。新工艺的生产成本比传统工艺明显降低,并达到了提高活性成分提取率、降低资源损耗、提高产品品质的目的。