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荧光互补系统(Fluorescence complementation, FC)是一种检测蛋白-蛋白、蛋白-RNA相互作用的新技术，主要包括双分子荧光互补（bimolecularfluorescence complementary，BiFC）与三分子荧光互补(trimolecular fluorescencecomplementary，TriFC)。该技术由于操作简单，结果直观，得以迅速推广。但是迄今，荧光互补系统应用仅限于细胞水平，还没有能够用于活体成像研究。
本研究将实验室前期建立的mNeptune荧光互补系统应用到活体成像研究。由于mNeputne的激发光（600 nm）和发射光（650 nm）都位于生物组织光学窗口内，为其应用到活体水平提供了可能。首先利用bJun-bFos的相互作用，在细胞水平定性定量地分析了mNeptune双分子荧光互补信号，并且与没有相互作用的bJun-mbFos间的荧光信号具有显著差异。将细胞注射到裸鼠小鼠皮下，在小鼠活体内可以直接探测到bJun-bFos的相互作用的荧光互补信号，实现了mNeptune双分子荧光互补系统的活体成像。之后，利用mNeptune三分子荧光互补系统，对流感病毒NS1与Np mRNA5UTR、人源多嘧啶结合蛋白(polypyrimidine tract binding protein，PTB)与HIV-1mRNA3LTR、PTB与HIV-1 Env CRS等蛋白与RNA之间的相互作用进行了荧光成像，并在小鼠活体内观察了这几种蛋白-RNA的三分子荧光互补信号，实现了mNeptune三分子荧光互补系统的活体成像。另外，利用免疫共沉淀技术（Co-immunoprecipitation，Co-IP）技术，也在体外验证人源蛋白和HIV-1 mRNA3LTR的相互作用，表明PTB可能在多次剪接的HIV-1 mRNAs出核过程中发挥了关键作用。