日粮添加甘露寡糖对肉鸡生长性能及天然免疫相关基因表达的影响研究

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基因编码的抗菌肽(又叫抗微生物肽或宿主防御肽,antimicrobial peptides, AMPs; host defence pepides, HDPs)广泛分布于昆虫、植物、动物及人体内,是机体天然免疫系统的重要组成成分,在机体的抗感染防御中发挥着重要作用。AMPs除具有广谱抗菌作用外,还可作为天然免疫和获得性免疫应答的沟通桥梁而提高机体获得性免疫水平,并作为细胞间的信号分子通过多重机制发挥免疫保护和抗感染作用。防御素和Cathelicidins是脊椎动物体内的两个主要抗菌肽家族。甘露寡糖(mannan oligosaccharide, MOS)具有抑制病原菌在肠道定植,促进肠道有益菌增殖,保护肠道健康,提高机体免疫力等作用。然而,MOS的益生作用机理尤其是天然免疫调节作用机制目前仍不十分清楚。为此,本研究旨在探讨日粮添加不同水平的MOS对肉鸡生长性能、血清细胞因子和组织天然免疫相关基因表达的影响,为其作为抗生素替代品添加剂的应用提供进一步的理论依据。选用176羽体重无显著差异(P>0.05)的1日龄科宝500白羽肉雏鸡(公鸡)随机分成4个组,每个组4个重复,每个重复11羽鸡。4个处理组为对照组及3个MOS试验组,对照组饲喂不含抗生素的基础日粮,试验组在基础日粮上分别添加0.3g/kg、0.6g/kg和0.9g/kg MOS,试验周期为42d。试验开始后以重复为单位记录每天饲料的投料量和剩料量,用于计算其消耗量,并于试验开始的第1d、第21d和第42d的清晨8:00以重复为单位对鸡只进行称重,测定其平均日采食量、平均日增重和料重比。同时,分别于第21d和42d时,从每个重复中随机选取2只鸡静翅脉采血,并立即宰杀分离其法氏囊、胸腺和脾脏,再于冰浴上采集肝脏、脾脏、回肠和盲肠,用于测定血清细胞因子含量、免疫器官指数及天然免疫相关基因表达。试验结果如下:(1)日粮添加MOS显著改善肉鸡的生长性能,其中添加0.3-0.9g/kg MOS显著提高肉鸡生长前期(1~21日龄)的平均日增重和降低料重比(P<0.05或P<0.01),且添加0.9g/kg MOS的可取得最佳的料重比;添加0.6g/kg MOS对肉鸡生长后期(22~42日龄)的平均日采食量和平均日增重的促进作用效果最明显(P<0.05或P<0.01),但添加0.3g/kg MOS可取得较佳的料重比。添加0.3~0.9g/kg MOS显著提高肉鸡生长全期(1-42日龄)的平均日采食量和平均日增重(P<0.05或P<0.01)。(2)MOS添加组肉鸡21日龄法氏囊指数和42日龄胸腺指数显著高于对照组(P<0.05),各阶段的其他免疫器官指数在各组间无显著性差异(P>0.05)。以0.6g/kgMOS添加组对免疫器官指数的作用效果最佳。(3)0.6g/kg MOS添加组肉鸡21日龄(P<0.05)以及0.3-0.9g/kg MOS水平组肉鸡42日龄(P<0.01)血清中的肿瘤坏死因子a (TNF-α)含量显著低于对照组;0.3~0.9g/kg MOS水平组肉鸡42日龄血清中的干扰素γ (IFN-γ)含量显著高于对照组(P<0.05)(4)日粮添加MOS对21日龄肉鸡肝脏、脾脏、回肠和盲肠以及42日龄肉鸡脾脏Toll样受体2(TLR2) mRNA表达无显著影响(P>0.05),但显著影响42日龄肉鸡肝脏、回肠和盲肠TLR2mRNA表达(P<0.05或P<0.01)。其中,添加0.3g/kgMOS对肉鸡回肠TLR2mRNA表达上调作用效果最佳,添加0.9g/kg MOS对肉鸡肝脏和盲肠TLR2mRNA表达上调作用效果最明显。日粮添加MOS对肉鸡21日龄脾脏、盲肠和42日龄盲肠Toll样受体4(TLR4) mRNA表达无显著影响(P>0.05),但显著影响21日龄肉鸡肝脏、回肠和42日龄肉鸡肝脏、脾脏、回肠TLR4mRNA表达(P<0.05或P<0.01)。其中,0.6g/kg MOS对21日龄肉鸡肝脏和42日龄肉鸡回肠组织TLR4mRNA表达的上调作用效果最好,添加0.9g/kg MOS对21日龄肉鸡回肠以及42日龄肉鸡肝脏、脾脏TLR4mRNA表达的上调作用效果最明显。(5)日粮添加MOS对21日龄肉鸡肝脏以及42日龄肉鸡肝脏和脾脏p-防御素9(AvBD9) mRNA表达无显著影响(P>0.05),但显著影响21日龄肉鸡脾脏、回肠、盲肠和42日龄肉鸡回肠、盲肠AvBD9mRNA表达(P<0.05或P<0.01)。其中,添加0.3g/kg MOS对肉鸡21日龄脾脏AvBD9mRNA表达上调作用效果最佳,添加0.6g/kgMOS对21日龄肉鸡回肠、盲肠以及42日龄肉鸡盲肠AvBD9mRNA表达上调作用效果最好,添加0.9g/kg MOS对肉鸡42日龄回肠AvBD9mRNA表达上调作用效果最明显。日粮添加MOS对21日龄肉鸡肝脏以及42日龄肉鸡回肠Cathelicidin-B1(Cath-B1) mRNA表达无显著影响(P>0.05),但显著影响21日龄肉鸡脾脏、回肠、盲肠和42日龄肉鸡肝脏、脾脏、盲肠Cath-B1mRNA表达(P<0.05或P<0.01)。其中,添加0.3g/kg MOS对21日龄肉鸡脾脏和回肠Cath-B1mRNA表达的上调作用效果最佳,添加0.6g/kg MOS对42日龄肉鸡肝脏Cath-B1mRNA表达上调作用效果最好,添加0.9g/kg MOS对肉鸡21日龄肉鸡盲肠以及42日龄肉鸡脾脏、盲肠Cath-B1mRNA表达上调作用效果最明显。综上所述,在本试验添加水平范围内(0.3~0.9g/kg),日粮添加MOS可显著提高肉鸡生长性能;显著提高法氏囊指数和胸腺指数,并具有提高脾脏指数的趋势;显著降低血清TNF-α提高血清IFN-γ的含量;日粮添加MOS可不同程度地上调肉鸡组织天然免疫相关基因TLR2、TLR4、AvBD9和Cath-B1的表达,由此提示,MOS可通过提高肉鸡组织TLRs表达并由TLRs介导上调p-防御素和Cathelicidins等抗菌肽表达而提高肉鸡天然免疫防御功能。综合生长性能、免疫器官指数和天然免疫相关指标,日粮添加0.6g/kg MOS可取得较佳效果。
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