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目前我国农药的使用技术水平低,导致农药的投入量增大。多菌灵和啶虫脒因低毒高效的特点,被广泛应用于设施农业当中。随着种植面积的扩大,多菌灵和啶虫脒的土壤残留问题日益突出,给生态环境带来了潜在的风险。应用微生物修复农药残留污染是一种安全、廉价、高效的方法,拥有巨大的潜力与应用价值。目前有关于农药残留修复的研究大多是农药污染物的高效降解微生物的分离与筛选以及其降解机制的研究,关于微生物菌剂保存条件的研究非常少,菌剂的保存问题阻碍了降解菌菌剂的大规模生产及应用推广。因此,本文以实验室从土壤中分离筛选得到的多菌灵降解菌株Rhodococcus qingshengii sp.nov.djl-6和啶虫脒降解菌株Pigmentiphaga sp.D-2作为供试菌株,研究了降解菌菌剂的不同保存剂型以及菌剂的初步应用,为降解菌剂的保存以及应用提供了一些依据。主要研究内容和结果归纳如下:1.多菌灵降解菌djl-6和啶虫脒降解菌D-2对农药的降解效果及其在青菜根部定殖能力的研究测定了菌株djl-6和菌株D-2对多菌灵和啶虫脒的降解效果,菌株djl-6能够在72 h完全降解无机盐培养基中浓度为50 mg/kg的多菌灵,菌株D-2能够在72 h完全降解无机盐培养基中浓度为50 mg/kg的啶虫脒。通过gfp标记了菌株djl-6和菌株D-2,将青菜幼苗分别浸泡于标记后的菌株djl-6和菌株D-2的菌悬液中培养3 d,取出后通过激光共聚焦显微镜(CLSM)观察了带有GFP标记的菌株在青菜根系表面的定殖情况。研究表明,两株降解菌均能够在青菜根部定殖。2.多菌灵降解菌djl-6和啶虫脒降解菌D-2液体菌剂的研发通过添加防腐剂和保护剂提高菌剂的活菌数,添加0.30%的柠檬酸钠、0.30%的羧甲基纤维素、0.20%的CaCl2作为保护剂的菌株djl-6的液体菌剂活菌数能够提高32.03%,添加0.20%的糊精、0.20%的柠檬酸钠、0.30%的CaCl2作为保护剂的菌株D-2的液体菌剂活菌数能提高38.70%。进行土壤农药残留的降解实验,两株降解菌的菌剂保存30d后,djl-6菌剂能够在10d内降解土壤中浓度为5 mg/kg的多菌灵。D-2菌剂能够在10 d内降解土壤中浓度为10 mg/kg的啶虫脒。研究表明,添加防腐剂和保护剂可以提高菌株djl-6和菌株D-2的活菌数以及降解效果。3.多菌灵降解菌djl-6和啶虫脒降解菌D-2固体菌肥的研发选择蚯蚓粪肥、猪粪肥、鸡粪肥、秸秆肥、米糠、泥炭以及花生壳粉作为载体,接种两株降解菌,将降解菌制成菌肥。在保存120 d时,除被污染的米糠菌肥之外,其余各菌肥中的活菌数均大于107cfu/g,在保存120d时,以djl-6作为接种微生物的菌肥活菌数最大的为蚯蚓粪载体菌肥,活菌数为7.01×108 cfu/g。以D-2作为接种微生物的菌肥活菌数最大为猪粪肥,活菌数为4.33×108 cfu/g。然后进行土壤农药残留的降解实验,以djl-6作为接种微生物的蚯蚓粪肥在保存30 d后能够在10 d内降解94.3%的浓度为5 mg/kg的多菌灵,以D-2作为接种微生物的蚯蚓粪肥在保存30 d后能够在10 d内降解95.5%的浓度为10mg/kg的啶虫脒。最后检测了菌株djl-6和菌株D-2在青菜根际土的定殖动态。研究表明,选择蚯蚓粪作为接种载体能够在保存120d时活菌数维持在108cfu/g,通过灌根的方式分别在土壤中接种终浓度为108cfu/g干土的菌株djl-6和菌株D-2,至少可以在青菜的根际土中定殖12d。添加蚯蚓粪肥可以提高djl-6和D-2的定殖数量。