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研究背景和目的：一直以来肿瘤的淋巴转移存在两种观点：一种观点认为是肿瘤细胞侵袭病灶周边原有淋巴管系统并进入淋巴液形成了淋巴结转移；另一种观点认为肿瘤细胞可以产生一些淋巴因子从而诱导新生淋巴管的形成而实现肿瘤的转移。前者长居主导地位,但近年来随着淋巴管标记物被逐渐发现,淋巴管生成在肿瘤转移中的作用被受到重视。本实验通过观察D2-40和淋巴管内皮透明质酸受体-1(Lymphatic Vessel Endothelial Receptor 1, LYVE-1)两种淋巴管标记物所标记的微淋巴管密度(microlymphatic vessel density, MLVD)在乙肝相关性肝癌中的表达,来分析D2-40和LYVE-1的相关性及测定价值,探讨微淋巴管密度与乙肝相关性肝癌的分化,淋巴转移、肿瘤直径以及临床病例参数之间的关系,并对微淋巴管密度(MLVD)与淋巴道转移的关系进行初步研究。方法：选取52例乙肝相关性肝细胞肝癌病理组织标本,10例正常肝组织标本,所收取标本中：病理切片发现有淋巴转移者19例,未发现淋巴转移者33例；癌组织呈低分化者22例,中高分化30例；乙肝相关性肝癌分期Ⅰ、Ⅱ期31例,Ⅲ期21例；乙肝病毒载量即HBVDNA≥105IU/L者23例,HBVDNA<105IU/L者29例；AFP(甲胎蛋白)≥400ng/ml者有34例,AFP<400ng/ml者18例等；对所有标本分别进行鼠抗人D2-40单克隆抗体及兔抗人LYVE-1多克隆抗体的检测并对其标记的微淋巴管进行计数,最后应用统计学软件SPSS12.0进行统计分析。结果：1.D2-40标记的乙肝相关性肝细胞肝癌的微淋巴管密度(MLVD)明显高于正常肝组织的MLVD,P<0.01,差异显著。肝细胞肝癌癌周组织MLVD明显高于癌内组织。MLVD在有淋巴转移组、无淋巴转移组分别为14.49±2.17、10.31±3.28,两组间比较P<0.05,差异有统计学意义。肝癌中-高分化组、及低分化组中MLVD分别为10.49±3.95,12.64±4.06,两组间比较P<0.05,差异有统计学意义。D2-40标记的肝细胞肝癌的MLVD与患者年龄、性别、肿瘤直径、临床分期、乙肝病毒病毒载量(HBVDNA)、AFP值等无关,差异无统计学意义,P>0.05。2. LYVE-1标记的肝细胞肝癌的微淋巴管密度也高于正常肝组织,肝细胞肝癌癌周组织MLVD高于癌内组织。在癌标本中-高分化组及低分化组中MLVD分别为8.86±2.78,11.31±3.15,两组间比较P<0.05,差异有统计学意义；LYVE-1标记的MLVD在有淋巴转移组、无淋巴转移组分别为12.44±3.09,,8.21±1.58,两组间比较P<0.05,差异有统计学意义。肝癌Ⅰ-Ⅱ期及Ⅲ期组分别为12.97±4.17,9.51±3.42,两组间有差异,P<0.05。LYVE-1标记的肝细胞肝癌的MLVD与患者年龄、性别、肿瘤最大直径、HBVDNA、AFP值等无关,差异无统计学意义,P>0.05。3.52例肝癌组织中D2-40标记的MLVD与LYVE-1标记的MLVD呈正相关,肝癌组织中检测LYVE-1标记的MLVD及D2-40标记的MLVD对预测乙肝相关性肝癌的淋巴转移均有一定的价值,但淋巴转移和分化组D2-40的阳性表达率和特异性要高于LYVE-1,而肝癌分期组LYVE-1阳性表达率要高于D2-40,P<0.05,两者联合检测价值可能更大。结论：1.D2-40阳性染色呈棕黄色颗粒,主要位于癌周边组织,而癌中心基本表达较少或者缺乏,它的特异性染色可以严格区分血管内皮和淋巴管内皮,特异性强。乙肝相关性肝癌癌组织中的MLVD明显多于正常肝组织,代表肝癌发生的过程中存在新生的微淋巴管。D2-40标记的MLVD与乙肝相关性肝癌的淋巴转移、分化程度相关,提示微淋巴管形成可能与乙肝相关性肝癌的淋巴转移和病情进展有关。2. LYVE-1阳性染色亦呈棕黄色,位于癌周间质淋巴管内皮及癌内一些肿瘤细胞的胞浆包膜,存在交叉反应和非特异性染色。它标记的MLVD与乙肝相关性肝癌的淋巴转移、分化程度及临床分期有关。提示微淋巴管可能与乙肝相关性肝癌的淋巴转移和病情进展有关,同时提示LYVE-1不是淋巴管内皮高度特异的标记物的最佳选择。3. LYVE-1和D2-40均为淋巴管内皮标记物,它们所标记的MLVD呈正相关,但D2-40较LYVE-1更适宜作为淋巴管内皮标记物,LYVE-1对肝癌分期的敏感性较高,两者可联合检测。