丙戊酸钠对女性甾体生成系统影响的初步研究

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目的: 通过猪的卵泡内膜细胞、正常女性及PCOS患者卵巢颗粒细胞原代培养体系,研究丙戊酸钠(VPA)对卵泡内膜细胞睾酮生成和对细胞色素P45017α羟化酶(CYP17)、胆固醇侧链裂解酶(P450scc)和类固醇激素急性调节蛋白(StAR)mRNA的影响;以及研究VPA对颗粒细胞激素生成及胆固醇侧链裂解酶(P450scc)、芳香化酶(P450arom)和类固醇激素急性调节蛋白(StAR)mRNA的影响。探讨VPA诱导女性多囊卵巢综合征的发病机制,论证化合物对女性排卵障碍产生影响的可能机理。 方法: 分别采用猪的卵泡内膜细胞、正常女性和PCOS患者卵巢颗粒细胞进行体外原代培养,并给予不同浓度的VPA(0mg/L、100mg/L和250mg/L)处理,48h后收集培养液,采用ELISA法检测猪卵泡内膜细胞的睾酮的水平,采用荧光实时RT-PCR(TaqMan.assay)方法检测猪卵泡内膜细胞中CYP17、P450scc和StAR mRNA表达。采用放射免疫方法测定正常妇女和多囊卵巢综合症患者卵巢颗粒细胞生成孕酮及雌二醇的水平,采用实时定量PCR方法测定以上颗粒细胞中P450scc、P450arom和StAR mRNA的表达。 结果: VPA刺激了猪卵泡内膜细胞睾酮分泌水平的升高(P<0.05),且
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