动物可食组织中安眠酮残留的ELISA检测方法研究

被引量 : 0次 | 上传用户:gg42201
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
安眠酮(methaqualone,MTQ)为喹唑酮类衍生物,属于非巴比妥类中枢神经镇定药。在临床上常做为镇静、催眠药物,也用于麻醉前给药。长期服用此药会产生依赖性或成瘾性,因此安眠酮成为世界各国的管制类精神药物。但是由于安眠酮生产工艺比较简单,不法分子转入地下大量生产安眠酮,大肆用于畜禽养殖。因此,必须控制安眠酮在动物性食品中的残留,保障消费者健康与安全。本文完成了安眠酮完全抗原的制备及鉴定,建立了用于快速检测动物可食组织中安眠酮的间接竞争ELISA法,并且优化了安眠酮在动物可食组织中的提取、纯化方法。本试验用采用活泼酯法将延伸出羧基的半抗原安眠酮与载体牛血清白蛋白(BSA)及卵清白蛋白(OVA)偶联制备人工完全抗原。采用紫外扫描光谱和SDS-PAGE电泳、红外扫描光谱以及间接ELISA试验均表明偶联成功。用间接非竞争ELISA法优化ELISA工作条件,建立了间接竞争ELISA检测MTQ在动物可食组织中残留检测的方法。方阵滴定法确定了MTQ包被抗原的浓度为1.25ug/mL,多抗MTQ阳性血清的工作浓度为1:64000,酶标二抗(兔抗羊IgG-HRP)工作浓度为1:5000。以系列稀释的MTQ标准溶液作为添加样品,绘制标准曲线,得到的线性回归直线方程为y=-0.2373x+0.5639,相关系数,r2=0.993,标准曲线在0.15~37.97 ng/ml之间呈较好线性关系,最低检测限0.18ng/ml。在组织提取部分,动物组织中安眠酮添加的平均回收率为86.29%,说明该方法动物组织中安眠酮能够较好地被回收。计算不同浓度的MTQ与抗血清进行竞争反应时的抑制率,对同一批次的检测结果进行分析,得到的标准竞争抑制曲线的批内平均变异系数为在2.21%-12.05%范围内,对不同批次的检测结果进行分析,得到的标准竞争抑制曲线的批间平均变异系数在5.24%~10.93%范围内,也表明本研究方法重复性较好。在可测定浓度范围内,安眠酮(MTQ)抗血清与地西泮可能会因同时使用而导致共同残留,该试验与其交叉反应率小于0.01%,这表明所建立的方法有较高特异性和选择性,适合安眠酮残留样本快速检测。
其他文献
本研究采用主观投射测试方法,考察我国大学生奥运志愿者在2008年北京奥运会前对于世界英语变体的了解和态度。研究对象为200名大学生奥运志愿者。研究涉及五种英语变体:中国
自1994年实行税制改革以来,我国逐步形成了对销售货物和加工、修理以及进出口所产生的增值额征收增值税,对其他劳务、无形资产以及不动产等征收营业税的税务格局,纵观多年来
成都市医药行业是成都工业的六大优势行业之一,且基本形成了化学制药、中成药、中药饮片、中药材生产、生物生化制药、医疗器械、药品包装材料和卫生材料等门类比较齐全的医
随着国民经济的不断发展,旅游产业同其他行业相比表现出了强劲的生命力并以惊人的速度快速发展。如何满足人们日益增长和多变的旅游需求,成为众多旅游目的地和旅游企业亟待解
<正>预算执行动态监控是根据国库集中支付制度和财政财务管理的有关规定,以动态监控系统为平台,对财政资金支付的全过程进行监督检查,并对发现的问题及时进行处理,以增强预算
汉语中有形式多样的称谓并用现象,这种现象的产生既有社会原因,也有历史的和心理的原因。本文对称谓并用现象进行了全方位的描写,并详细分析了称谓并用的构成方式及其使用条
为了建立适于叶底红的高效组织培养再生体系,以无菌苗继代培养获得的丛生芽为外植体,在6种不同基本培养基单因子试验的基础上,采用L9(34)正交试验设计探讨了6-BA、NAA、KT等3
在全球信息化的发展建设中,对于"数字鸿沟"的广泛关注主要是在美国国家远程通信和信息管理局发表《在网络中落伍》的系列著名报告之后。数字鸿沟也是中国信息化建设中一个重
随着科学基金在中国基础研究中的地位和作用日益显著,国家对科学基金的投入也在逐年上升,而中国科学基金与国外发展较为成熟的科学基金相比在财务管理和风险评价方面存在一定
改革开放以来,我国的经济开放程度得到了很大的提高,在对外开放广度和对外开放深度上,我国对外开放水平都呈现出非常强的上升趋势。我国对外贸易在外贸体制改革的基础上,走上