【摘 要】
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比较了两种温度、两种光照强度、四种培养基对海带丝状雌配子体弧雌生殖的影响,结果表明:温度为10.0±0.5℃、光照强度100±5μEms、含铁氮磷营养海水培养基是适宜弧雌生殖的
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比较了两种温度、两种光照强度、四种培养基对海带丝状雌配子体弧雌生殖的影响,结果表明:温度为10.0±0.5℃、光照强度100±5μEm<-2>s<-1>、含铁氮磷营养海水培养基是适宜弧雌生殖的条件.在温度、光照强度和培养基三种因素中,培养基组成是影响弧雌生殖速率和效率的最重要因素;在九个丝状雌酏子体品系中找到了三个弧雌生殖速度较快的丝状雌配子体品系,即029,003,030.研究了高血压氦气基因枪(PDS-1000/He型)6种可裂膜,5种DNA浓度,3种射程等对海带转化效率的影响,认为可裂膜压力1100Psi,射程为6cm是海带转化的最佳参数,DNA浓度在一定范围内增加有助于提高转化效率.比较了CaMV35S,Ubiquitin启动子在海带中的表达效率,发现Ubiquitin启动子能够驱动外源基因在海带中瞬间表达,且表达效率高于CaMV35S.将人乙型肝炎病毒表面抗原基因(HsBAg)连接于标记基因CAT(氯霉素乙酰转移酶)之后,构成嵌合基因,用基因枪在上述优化的参数下导入海带丝状雌配子体003和002品系,在较适宜的条件下诱导弧雌生殖,经氯霉素筛选,海上养成,得到抗性海带110株.蛋白质含量测定结果表明,转基因组成分析表明,转基因海带中所测到的16种氨基酸均比对照组海带有不同程度的提高,总氨基酸的绝对含量提高了1.8%.蛋白质和氨基酸的测定结果初步证实了外源基因在海带中稳定表达,揭示利用海带作为生物反应器生产乙肝疫苗的可行性.
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