硬蜱IgG结合蛋白的生物学功能分析

来源 :中国农业科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jianghui_one1
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
蜱是吸血性体外寄生虫,其吸血过程中对宿主的损伤和引起的蜱传病,对畜牧业经济和人类的健康造成影响日益严重,因此世界范围内对蜱的防控也越来越受到重视。在蜱与宿主复杂关系中,蜱对宿主免疫反应的应对机制是蜱防控的研究重点之一。随着研究的逐步深入,发现蜱的多种蛋白因子参与对宿主免疫反应的调节作用,这些分子在蜱与蜱传病防治应用上和医药研究上都有很大价值,其中蜱的免疫球蛋白结合蛋白(IGBPs)就是这样的一类因子,已经发现其具有在蜱体内与宿主IgG结合并清除宿主IgG的作用,但其详细功能和作用机制仍不清楚。镰形扇头蜱是硬蜱总科扇头蜱属,在我国南方广泛分布。本实验室已经克隆了一种镰形扇头蜱免疫球蛋白结合蛋白(RH-IGBP),对其不同生长阶段的表达分布特点进行了RT-PCR分析,并对其抗蜱免疫保护性进行了检测,结果说明了其在蜱的各个阶段都有表达,具有一定的免疫保护性。为深入阐述IGBPs功能作用特点,本实验以RH-IGBP为对象,在已有研究的基础上,从五个方面展开工作。其一,对RH-IGBP进行大肠杆菌原核表达,利用表达重组蛋白制备抗体,收集吸血雌雄成蜱的各器官,对RH-IGBP性别和器官分布特点进行分析,结果显示其在吸血雄蜱中大量表达,以唾液腺为最丰富。其二,对RH-IGBP进行真核重组表达,研究重组真核蛋白与不同哺乳动物宿主(兔,猪,牛,羊,小鼠,犬)和人的IgG结合能力,发现IGBP与不同宿主IgG结合能力不同,与兔、猪的IgG有明显结合能力,与犬有一定结合能力,和羊,牛,小鼠结合能力更弱,与人的不表现结合能力。对来自兔源IgG不同酶切片段F(ab’)2和Fc与RH-IGBP结合特性分析表明,蜱IgG结合蛋白主要识别部位是IgG的F(ab’)2片段,但是随着浓度升高,Fc也表现出结合迹象。其三,用牛血清白蛋白BSA免疫实验兔,三免效价达到较高滴度后,饲喂镰形扇头蜱雌雄蜱叮咬吸血,每天解剖蜱取血淋巴,唾液腺和肠道,利用间接ELISA和Westernblot方法检测宿主IgG,证实了在镰形扇头蜱体内存在宿主IgG的运输、转移机制,同时发现于吸血第四天雄蜱唾液腺和血淋巴中检测到高浓度RH-IGBP,雌蜱仅在吸血第三天的唾液腺里检测到。其四,对RH-IGBP进行RNA干扰实验分析,利用RealtimePCR和Westernblot方法检测基因沉默效果,结果表明此基因实现沉默,而对蜱的饱血时间,饱血体重,产卵率和孵化率等参数进行统计,发现实验组与对照组均没有明显差别,提示我们IGBPs对蜱吸血和繁殖过程的直接影响不显著,或者存在其他代偿机制。最后,我们在璃眼蜱属的亚洲璃眼蜱中也克隆出了一个IGBP基因(HA-IGBP),此基因与RH-IGBP在基因序列上有80%的保守性,在氨基酸序列上有76%的保守性,具有信号肽和与固有免疫有关的结构,利用RealtimePCR对不同生长阶段蜱中HA-IGBP的表达进行分析,结果显示,其与RH-IGBP的表达特点相似,既吸血雄蜱表达丰度最高,不过HA-IGBP在吸血雌蜱里也表现很高丰度,这点与RH-IGBP以雄蜱为主的分布特点不同;另外HA-IGBP在吸血成蜱之前的几个阶段表达丰度均较低,而在未吸血幼蜱阶段相对较高,这点尚未在别的蜱种里得到验证。总之,在关于IGBP的研究进展整体较少的情况下,本实验为后续对IGBPs作用机制的更深入的解析提供了基础。
其他文献
通过室内好氧培养试验,研究了双氰胺(DCD)和2-氯-6-三氯甲基吡啶(Nitrapyrin)2种常用硝化抑制剂对我国4种典型茶园土壤硝化过程的影响。试验设置5个处理:(1)尿素(CK);(2)尿素+2%DCD(DCD占
采用涡度相关技术对南方"双季稻-冬闲田"生态系统CO2通量进行了一年的连续监测,分析了"双季稻-冬闲田"生态系统碳交换[净碳交换量(NEE)、总初级生产力(GPP)和生态系统总呼吸(Reco)]的动
<正> 引言蝎子(又名全蝎、全虫)是我国传统的名贵中药材和出口商品,也是宴席上一大名菜,还可用于配制高档保健药酒。全蝎作为药用,已有1000多年的历史。目前,它的药用价值更
为提高油葵对农田土壤重金属的提取效率,研究了不同螯合剂(NTA、EGTA、EDDS和EDTA)对油葵修复Cd、As复合污染农田土壤的影响。结果表明,施用4种不同螯合剂对油葵根、茎、叶、
波粒二象性是量子力学中最重要、最根本的概念之一,但对于光既是波又是粒子,且随着观测手段不同而分别观察到波动性或粒子性这点在高中物理课程中讲解得比较抽象,学生一般都
在化学实验室中,用特定的仪器来测定质量、体积和温度。
<正>开封具有悠久的农耕历史和深厚的文化积淀,特别是农产品资源优势和当地农村农民所传承的文化资源优势,是助力农业转型升级的重要基础条件。开封农业要用好国家和省相关发
本文研究了二维非极性晶体中通过形变势与声学声子强、弱耦合激子的性质,采用线性组合算符和简单的么正变换,得到了强、弱耦合情形的非极性晶体中表面激子的有效哈密顿量、激
本文采用密闭箱-气相色谱法研究不同沼液灌溉模式,小麦-玉米轮作条件下温室气体的排放特征,并运用全球增温潜势(GWP)和气体排放强度(GHGI)对小麦-玉米排放的温室效应进行估算
晚自修铃响的时候,十几个人以百米赛跑的速度飞奔出去。这些女生平时谈到800米时的恐慌程度不亚于谈到“非典”,其实如果以这样的速度去跑800米准没问题。我最终没有抢到水龙头