甘薯基腐病病原鉴定与杀菌剂的室内筛选

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甘薯基腐病是近几年在我国新发现的、危害性极大的甘薯真菌性病害。本文对甘薯基腐病疑似植株进行病原菌的分离和鉴定,研究了部分生物学特性指标对P.destruens代表性菌株GLHY04、GLWL02和GLTT01菌丝生长、菌落形态和孢子萌发的影响;基于EF1-α看家基因设计了甘薯基腐病病原菌特异性引物EFdesF/EFdes-R,建立了基于特异性引物的快速检测方法,对浙江省甘薯产区的166份疑似样本进行了检测;对菌株GLHY04、GLWL02和GLTT01进行室内有效杀菌剂的筛选,为该病害的田间防控奠定了理论基础。主要研究内容如下:1.田间调查与病原鉴定:在浙江省对甘薯基腐病进行田间调查,发现病害发生面积逐年增加,发病率逐年增重,造成了巨大的经济损失。对甘薯基腐病典型症状组织进行病原菌的分离纯化和致病性测试,通过形态学观察、分子生物学鉴定和系统发育分析,将甘薯基腐病病原菌鉴定为毁灭拟茎点霉(P.destruens)。2.病原菌生物学特性研究:对代表性菌株进行了生物学特性的研究,实验结果发现毁灭拟茎点霉是一种适宜室温、喜光、pH适宜范围广的病原菌,菌丝致死温度为49℃,分生孢子致死温度为48℃。3.快速检测方法的建立:基于P.destruens的EF1-α基因序列,设计了一对特异性引物EFdes-F/EFdes-R,验证了其特异性和灵敏度。并用这对特异性引物对166份甘薯基腐病疑似样本进行检测,发现特异性PCR法与常规分离法相比可节约6 d,且准确性更高。4.室内有效杀菌剂筛选:收集市场上对植物真菌病害具有防控效果的杀菌剂12种,分别测定这12种杀菌剂对甘薯基腐病菌代表性菌株GLHY04、GLTT01和GLWL02菌丝生长及孢子萌发的抑制作用,测定结果表明:春雷霉素、苯醚甲环唑、吡唑醚菌酯、恶霉灵、吡萘嘧菌酯、甲基硫菌灵和噻苯咪唑等7种杀菌剂对供试菌株有较好的抑菌效果。
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