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糖异生是由非碳水化合物产生葡萄糖一个前体的重要代谢途径，如有机酸，脂肪酸，氨基酸或甘油等。果糖-1，6-二磷酸酶(FBPase)是糖异生代谢途径中一个关键酶，该酶催化水解果糖1，6-二磷酸(FBP)形成果糖-6-磷酸(F6P)和磷酸盐(Pi)。产物果糖-6-磷酸是一个在各种生物合成途径的重要前体。它是果糖磷酸激酶催化糖酵解反应的逆反应，该反应为不可逆反应。 为了全面了解各种FBPase，我们课题组开始研究蓝藻FBPase，拟南芥FBPase和人的FBPase。人的FBPase可以做酶靶标治疗糖尿病。大肠杆菌FBPase与蓝藻FBPase同源性达到37％，因此大肠杆菌Ⅱ型FBPase-GlpX来说研究这个酶我们对了解细菌FBPsae有意义。此外可以进一步的了解高等植物，动物，蓝藻及细菌FBPase的各自的特点，它们之间的统一性和差异性包括生物化学性质，空间结构，活性空腔，结合方式，对应的抑制剂等等。此外，大肠杆菌Ⅱ型FBPase-GlpX是一种潜在的杀菌剂靶标。本文以大肠杆菌Ⅱ型FBPase-GlpX为研究对象，具体研究如下: (1)按蛋白纯化方法获得纯度较高的大肠杆菌FBPase-GlpX蛋白，蛋白纯度达到95％以上，纯化后得到的蛋白大小36kDa。 (2)优化大肠杆菌Ⅱ型FBPase-GlpX测活条件，确定最优蛋白测活条件是:蛋白含量2.1mg/ml，Mn2+终浓度50.0μM，FBP终浓度0.5mM，缓冲液PH值8.0，反应时间5min，反应温度30℃。在此条件下测定GlpX的比活力为2.0±0.3U/mg。 (3)对大肠杆菌Ⅱ型FBPase-GlpX为酶靶标的抑制剂筛选的研究很少。我们首先通过理论设计获得针对该酶活性空腔的抑制剂，然后通过酶活测试分析这些化合物在酶水平上的生物活性。在这工作中，在实验室保存的23个A系列化合物、30个C系列化合物、17个D7S-D13S系列化合物、30个H系列化合物、14个S系列化合物、34个LH系列化合物、110个TQD系列化合物等200多种化合物在酶水平上进行了筛选。其中有12个化合物是抑制率80％以上，有34个抑制率50％以上的化合物。TQD系列化合物在粗筛选中抑制率80％以上。进一步研究获得这些化合物的IC50，其中TQD152，TQD151，TQD154，TQD153的抑制效果很好，IC50分别是3.40±1.83μM,3.91±1.45μM,7.18±1.84μM,7.87±1.84μM。