IL-10在大鼠真菌性角膜炎中的表达

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目的观察白细胞介素10 (interleukin-10,IL-10)及环氧合酶2(cyclooxygenase,COX-2)在大鼠真菌性角膜炎中的表达情况,给予选择性COX-2抑制剂NS-398,观察药物干预前后IL-10的变化并分析其意义。方法健康Wistar大鼠85只,雌雄不限,在刮除上皮的大鼠角膜涂布以茄病镰刀菌标准菌落并覆盖自制角膜接触镜,建立角膜真菌感染模型。大鼠随机分为3组,A组5眼为空白对照组、B组40眼为真菌感染模型组、C组40眼为模型加药物干预组,其中A组不予任何处理,B、C两组右眼均为实验眼,建立真菌模型,左眼为实验对照眼,仅覆盖角膜接触镜。模型建立后实验组分别于模型建立后第1天打开眼睑,B组给予PBS滴眼,C组给予NS-398滴眼,每日4次。造模后第1d、3d、7d、14d处死大鼠,取角膜。HE染色、PAS染色观察角膜组织病理变化并检测真菌生长,运用免疫组织化学和RT-PCR技术检测各组不同时间点COX-2与IL-10的表达情况。结果1、组织病理学观察见真菌性角膜炎病灶内有大量中性粒细胞浸润并伴有严重的组织坏死,PAS染色检查见菌丝及孢子可达基质浅层及中层。2、COX-2在空白对照及对照眼角膜基本不表达;B组在接种真菌后1d开始出现COX-2的表达,并逐渐增高,第14d表达减弱至不明显,各时间点比较差异具有显著性(P<0.01);C组与B组比较第1d、14d COX-2表达差异无显著性(P>0.05),3d、7d表达明显降低,差异具有显著性(P<0.01)。3、IL-10在空白对照及对照组角膜基本不表达;B组在接种真菌后IL-10的表达先增高后降低,各时间点比较差异有显著性(P<0.01);右眼C组与B组比较第1d IL-10表达差异无显著(P>0.05),3d下降、7d、14d表达明显增高,差异具有显著性(P<0.01)。结论1、PAS染色、10%氢氧化钾涂片及组织刮取物行菌落培养证实大鼠真菌性角膜炎动物模型建立成功。2、COX-2表达于真菌性角膜炎组织中,是真菌性角膜炎病变过程中的敏感炎性因子,NS-398可抑制真菌性角膜炎COX-2的表达。3、IL-10表达于真菌性角膜炎组织中,提示IL-10可能参与了真菌性角膜炎的发生与发展,NS-398可增强真菌性角膜炎角膜组织中IL-10的表达,即使在病变后期IL-10也有较强的表达,同时段病理显示角膜混浊减轻,提示IL-10可能参与了后期角膜组织的抗损伤修复过程。
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