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研究背景特发性肺纤维化（IPF）是一种慢性不可逆的致死性疾病。在IPF的发展过程中,肺成纤维细胞受到激活并且分泌大量的细胞外基质,以及异常的损伤修复,最终导致了纤维化的形成。肾素-血管紧张素系统（RAS）是本课题研究重点,包含血管紧张素转化酶（ACE）-血管紧张素（Ang）Ⅱ-AngII-1 型受体（ATIR）轴和 ACE2-Ang（1-7）-Mas轴。Ang Ⅱ和Ang（1-7）作为RAS中的代表性多肽,二者功能相对拮抗,在机体的水电解质代谢、血管收缩等维持机体生存方面有着重要作用,近些年发现其与纤维化有密切联系。我们前期的研究及近年对RAS在器官纤维化中的研究表明,ACE-Ang Ⅱ-ATIR轴增加氧化应激,诱导心肌、血管、肝脏和肺脏的纤维化,而ACE2-Ang（1-7）-Mas轴通过拮抗ACE-AngIl-ATIR轴,降低氧化应激发挥抗纤维化作用。本研究继续探讨ACE2-Ang（1-7）-Mas轴改善肺纤维化的新机制,并将自噬作为研究的新方向。自噬是细胞内各种组分被运送至溶酶体并被降解和重新利用的过程,不仅参与生理活动的调节,还参与调节氧化应激、器官纤维化等多种病理过程。自噬能够改善肺纤维化,但目前对于ACE2和Ang（1-7）在自噬方面的研究,主要在心脑血管系统,大多表现为抑制自噬,但也有诱导自噬的报道。ACE2-Ang（1-7）-Mas轴的自噬水平如何,干预自噬对于氧化应激和肺纤维化的影响如何,将是本研究关注的重点。目的探究ACE2-Ang（1-7）-Mas轴自噬水平如何,调控自噬对氧化应激和肺纤维化的影响。研究方法1、原代肺成纤维细胞分离、纯化、鉴定及培养。2、细胞ATP含量测定。3、动物模型建立。4、肺组织切片染色和免疫组化。5、蛋白质免疫印迹法。研究内容探究Ang（1-7）和ACE2对自噬蛋白表达水平的影响,干预ACE2-Ang（1-7）-Mas轴和自噬通路,检测自噬、胶原和NOX4蛋白表达水平。博来霉素诱导小鼠肺纤维化,评价小鼠肺组织纤维化水平和NOX4、自噬蛋白水平,进一步验证ACE2-Ang（1-7）-Mas轴改善肺纤维化的机制。结论1.Ang（1-7）诱导自噬,降低Ang Ⅱ诱导的胶原和NOX4水平,Mas拮抗剂A779通过抑制自噬逆转这一作用。2.ACE2+/+肺成纤维细胞自噬水平增高,减轻Ang Ⅱ诱导的胶原和NOX4水平,A779和自噬抑制剂逆转上述作用。3.ACE2+/+小鼠对BLM诱导的肺纤维化有保护作用,表现为肺纤维化程度和氧化应激水平下降,自噬水平增高。