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以玉米籽粒为原料通过硫酸铵分级沉淀、凝胶过滤和金属螯合亲和层析三步纯化了玉米SOD。电泳后活性染色与蛋白染色均得到三条谱带,达到了电泳纯。
针对SOD作为药用酶的缺陷,本文对SOD进行了修饰与固定化研究。首先,用PEG对玉米SOD进行了化学修饰。修饰率46%,SOD活性保持度为81%。结果表明,PEG修饰玉米SOD是可行的,PEG是一种较好的SOD化学修饰剂。
为增强玉米SOD的细胞透性,本研究采用旋转薄膜-超声波法制备了SOD饱和卵磷脂的小单层脂质体,利用SOD活性方法测定了包封率,通过正交试验设计确定的最佳制备条件。
利用本实验室纯化的玉米SOD,以外消旋d,l-聚乳酸为载体,采用复乳溶剂挥发法制备了SOD-聚乳酸微球,通过正交试验设计考察聚乳酸浓度、SOD酶液量、聚乙二醇浓度、乳化剂的用量对微球包封率及粒径的影响,确定微球制备的最佳条件,并考察微球SOD的理化性质。结果表明,采用复乳溶剂挥发法得到了包封率较高、粒径大小和分布均较满意的SOD聚乳酸微球。与天然SOD相比,微球SOD的最适温度基本不变,最适pH有所增加,温度稳定性和pH稳定性均有所增强。