重症胰腺炎继发感染的功能性成像诊断及其与CT比较的实验研究

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第一部分正常猪胰腺的CT、MRI表现及多期增强扫描方案的研究目的:研究大动物猪正常胰腺的CT、MRI表现及多期增强扫描的最佳方案。方法:健康幼猪10只,行CT平扫及薄层动态增强扫描,其中6只同时行MRI扫描,序列包括T1WI、T2WI、DWI、MRCP。扫描结束后10只猪均剖腹及离体观察胰腺的形态及位置,并与影像学表现对照。结果:(1)猪胰腺分为胰头及左、右两叶,呈“三叶草”形。其中左叶为胰腺的主体部分,其解剖位置、大体形态、胰周血管、胰实质密度、MRI T1加权像、T2加权像信号、弥散加权成像(DWI)信号及ADC值等均与人类胰腺相近。(2)MRCP显示猪的胰胆管系统与人不同,分别开口于十二指肠,相距约5-9cm;胆管较粗,直径约5-6mm,易显示;而胰管纤细,值径约1-1.5mm,生理状态下MRI对其显示欠佳。(3)螺旋CT多期增强扫描时间密度曲线与人类相似,但胰腺三期增强扫描即动脉期、胰实质期、门脉期最佳延迟时间较人早,分别为15s、35s、45s。结论:大动物猪胰腺的CT、MRI表现及多期增强扫描方案与人类有许多相似之处,可作为胰腺疾病影像学研究较理想的平台。第二部分SAP继发感染大动物模型的的建立及其CT表现【目的】建立适合影像学研究的大动物重症胰腺炎(SAP)继发感染模型,并研究其CT表现。【方法】将30只幼猪随机分为实验组20只与对照组10只。分两步建立模型:第一步,建立SAP模型。两组均采用主胰管逆行插管注射5%牛磺胆酸钠(0.5 ml/kg)及胰蛋白酶((5000 U/kg)混合液,而后将主胰管结扎。第二步,SAP模型建立后,应用CT引导下细针穿刺技术向胰腺坏死区内注射大肠杆菌(简称:注菌),实验组注射活性大肠杆菌悬液(108个/ml)3-4ml,对照组用同样方法注入3-4ml灭活大肠杆菌。两组分别于SAP模型制备术后1小时及感染后5天行多层螺旋CT动态增强扫描,观察CT表现并进行CTSI评分。两组同时查血淀粉酶、血常规、血液细菌培养等指标。检查结束后开腹观察、测量感染灶或坏死灶大小、抽液涂片及细菌培养,感染灶或坏死灶周围组织取材行病理检测。将CT表现与手术所见及病理对照。【结果】(1)模型建立情况:实验组16只成功建立SAP继发感染模型,成功率80.0%(16/20),共发现17处感染灶,感染灶细菌培养阳性率100%(17/17),血液细菌培养阳性率68.8%(11/16)。对照组6例建立完成对照模型的建立。(2)生化检验结果:①两组血清淀粉酶在SAP术后1小时未见明显升高,24小时后开始明显升高。实验组感染后1-2天与SAP术后24小时比较,感染后血清淀粉酶水平高于感染前。②两组白细胞计数在SAP模型建立术后1h开始升高,注菌后1-2天升至最高水平,其后呈下降趋势。注菌后1-2天及5天后,实验组白细胞计数明显高于同期对照组。(3)CT检查结果:CT诊断胰腺炎继发感染的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测分别为17.6%、66.7%、60.0%、22.2%,YI为-0.157,Kappa值-0.08。两组在SAP模型建立后1h,CTSI评分均>5分,严重程度均为中重度。SAP模型建立后1h及注菌后5天,两组CTSI分数比较,经非参数Wilcoxon秩和检验,x2分别为0.166、0.397,P值均>0.05,无统计学意义。[结论](1)CT引导下SAP坏死区内注射细菌法建立SAP继发感染大动物模型的成功率高,可为研究该病发病机制及其临床诊治提供良好的平台,尤其适合影像学研究。(2)螺旋CT在非感染性SAP诊断及严重程度评估中具有重要价值,但诊断胰腺炎继发感染的敏感性和特异性不高。因此,CTSI评估感染性SAP严重程度时可能存在一定误差。第三部分SAP继发感染99Tcm-环丙沙星功能性显像及其与CT比较的实验研究【目的】(1)用99Tcm标记环丙沙星(Ciprofloxacin)并评估其生物学性能;(2)探讨新型显像剂99Tcm-Ciprofloxacin(99mTc-CPF)功能性成像检测胰腺炎感染灶的价值和限度,并与CT进行对照。(3)99Tcm-CPF功能性成像与CT联合在诊断胰腺炎继发感染中的意义。【方法】(1)制备99Tcm-CPF,测定其稳定性,并研究其在正常幼猪及SAP继发感染幼猪体内的分布。(2)正常组为6只健康幼猪,实验组为16只感染性SAP幼猪,对照组为6只非感染性SAP幼猪,三组分别行99Tcm-CPF显像、CT扫描。检查结束后歼腹观察、测量感染灶大小、抽液涂片及细菌培养,感染灶周围组织取材行病理检测。将两种影像学单独及联合诊断结果分别与病理结果对照,比较它们检出SAP继发感染的敏感性和特异性以及评估SAP严重指数等指标的价值。统计学分析,当P<0.05认为有统计学意义。[结果](1)99Tcm-CPF在6h内标记率和放化纯均>90%。99Tcm-CPF静脉注射后主要分布在血供丰富的器官,如肾、肝、脾中,胃肠道内无明显摄取,血液清除快,主要经泌尿系统排泄。正常胰腺和胰腺炎组织在各时段99Tcm-CPF摄取均不明显。感染性SAP幼猪模型显像表明:注射99Tcm-CPF 1h后胰腺感染灶开始显影,给药后放射性摄取3h达到高峰,为该模型最佳显像时间,此时感染灶-本底放射性比值为3.36±0.33。(2)99Tcm-CPF显像:检测感染灶敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测分别为88.2%、83.3%、93.8%、83.3%,约登指数为0.715,Kappa值0.667。(3)CT扫描:诊断继发感染灶敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、约登指数、Kappa值分别为17.6%66.7%60.0%22.2%-0.157 -0.08。(4)两者联合:①检测感染灶敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测分别为88.2%、83.3%、93.8%、83.3%,约登指数为0.715,Kappa值0.667,上述指标与99Tcm-CPF显像单独诊断时相同。②两者联合计算SAP严重指数。实验组,CTSI与联合严重指数分数比较,经配对,检验,t=4.81,P<0.001,即当SAP继发感染时联合严重指数高于CTSI。对照组两者比较,经配对t检验,t=1.00,P>0.1,即非感染性SAP时联合严重指数与CTSI无差异。【结论】(1)新型显像剂99mTc-CPF放射性分布适合胰腺炎继发感染灶显像,最佳显像时间在在注药后3小时。(2)99mTc-CPF能特异地与细菌结合,检测SAP继发感染灶的敏感性和特异性高,显著优于CT,可单独作为早期诊断胰腺炎伴发感染的手段;CT对判断SAP早期感染方面价值低,但对坏死区定位、测量准确,可对非感染性急性胰腺炎严重度进行准确评估;(3)在评估SAP继发感染的严重程度时,采用两者联合严重指数较CTSI更准确。因此,两者联合应用有利于重症胰腺炎继发感染的诊断和严重程度的评估。
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