PKC作用下CD34分子在细胞膜和细胞内的分布的变化

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CD34是一种高度糖基化的膜蛋白,在早期造血干细胞和内皮细胞以及胚胎成纤维细胞表达.文献报道在CD34阳性的造血干细胞系中,在PKC的作用下,CD34分子被高度磷酸化,并迅速实现了膜上调,这种上调是不依赖于新生的CD34分子的mRNA或蛋白质的.但在CD34阳性的非造血干细胞,未见文献报道这种现象.该实验以CD34阳性的胚胎成纤维细胞系NIH 3T3为研究对象,试图确定在CD34阳性的非造血干细胞是否也有此种膜上调现象,进而为阐明该信号传导途径的机制打下基础.由于推测这种信号传导过程与CD34分子的胞内区有关.因而我们构建了小鼠全长型(MF),截短型(MT),胞内区删除型(MC)CD34与GFP的融合蛋白表达重组质粒,转染NIH 3T3细胞,荧光显微镜和激光共聚焦显微镜观察发现三者均实现了正常的膜功能表达.在PKC的作用下,全长型,截短型的CD34与GFP的融合蛋白出现了明显的膜表达增强,而删除型CD34与GFP的融合蛋白则无膜表达增强.说明在CD34阳性的胚胎成纤维细胞系NIH 3T3也有PKC作用下的膜上调现象.而转染CD34阴性的Hela细胞系,无此现象的发生.因此说明了PKC作用下的CD34膜表达增强可能是CD34阳性细胞的普遍现象,这种现象在CD34阴性的Hela细胞系未实现说明PKC作用下的CD34膜表达增强可能是CD34阳性细胞系所特异的.
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