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目的1.循证医学研究评价补肾活血中药治疗膝骨关节炎的有效性及安全性。2.临床研究评价补肾活血中药龙鳖胶囊治疗膝骨关节炎的临床疗效、患者生活质量及安全性。3.动物实验研究依据龙鳖胶囊对膝骨关节炎(KOA, Knee Osteoarthritis)大鼠的膝关节肿胀度及大鼠体重、脏器指数和关节滑膜、软骨病理形态学的改善作用,观察龙鳖胶囊对大鼠膝骨关节炎的治疗作用；观察龙鳖胶囊对膝骨关节炎大鼠血清白细胞介素-1 β(IL-Iβ)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-6(IL-I0)水平及膝关节病变组织中P38MAPK、 NF-κB信号传导通路中MEK-3/6、p38、ATF2、NF-κBp65和P-MEK-3/6、P-p38、P-ATF2、 P-NF-κ Bp65表达水平的影响,进而探讨龙鳖胶囊治疗膝骨关节炎的可能作用机制。方法：1.循证医学研究计算机检索中国生物医学文献数据库(CBM)、中国期刊全文数据库(CNKI)、万方资源数据库、维普期刊数据库、Pubmed、Embase 和 Cochrane Library中关于补肾活血中药对比非甾体类抗炎药(Nonsteroidal Anti-inflammatory Drugs, NSAIDs)治疗膝骨关节炎的随机对照试验文献。对纳入研究的文献采用Jadad量表和Cochrane Handbook 5.1评估文献质量和偏倚性风险,采用软件RevMan 5.3.5进行数据分析,并运用GRADE系统对本研究得到的证据进行质量评价。2.临床研究采用简单随机对照将符合纳入标准的88例患者,随机分为龙鳖胶囊组44例和塞来昔布组44例,分别给予口服龙鳖胶囊和塞来昔布,两组均以4周为观察期,对两组患者治疗后的临床疗效、VAS评分、Lequesne指数、胃肠道不良反应及关节炎影响测定量表评分进行评价。3.动物实验研究建立膝骨关节炎大鼠模型,于造模后开始给予低、中、高剂量的龙鳖胶囊灌胃(0.3125,0.625,0.9375g·kg-1),连续4周,观察龙鳖胶囊对KOA大鼠的膝关节肿胀度及大鼠体重、脏器指数的影响,HE染色观察光镜下关节滑膜、软骨的一般形态,并对滑膜组织的病理学进行评分,Masson染色观察光镜下关节软骨的一般形态,并对软骨进行Mankin’s评分；ELISA法检测血清白细胞介素-1 β(IL-I β)、白细胞介素-6(IL-6)及白细胞介素-10(IL-I0)水平,免疫组化SP法检测滑膜和软骨组织中MEK-3/6、p38、ATF2、NF-κ Bp65和P-MEK-3/6、P-p38、P-ATF2、P-NF-κ Bp65的表达情况。结果：1.循证医学研究纳入22篇随机对照试验文献,共2029例,其中补肾活血中药1022例,NSAIDs组1007例。Meta分析提示：与NSAIDs相比,补肾活血中药具有更高的总有效率(RR=1.10,95%CI[1.06,1.15],P<0.00001)和临床控制率(RR=1.48,95%CI[1.19,1.84],P=0.0003),更低的胃肠道不良反应(RR=0.18,95%CI[0.09,0.35],P<0.00001)。补肾活血中药和NSAIDs在改善WOMAC评分、Lequesne指数、KSS评分、Lysholms评分和VAS评分方面比较,差异均无统计学意义(P>005)。GRADE证据质量评价提示：补肾活血中药的总有效率高于NSAIDs(低质量证据),补肾活血中药的临床控制率高于NSAIDs(氏质量证据),补肾活血中药与NSAIDs在改盖WOMAC评分、Lequesne指数、KSS评分、Lysholms评分和VAS评分方面无差异(极低质量证据),补肾活血中药的胃肠道不良反应低于NSAIDs(低质量证据)。2.临床研究龙鳖胶囊组总有效率92.25%,塞来昔布组总有效率90.00%,两组总有效率差异无统计学意义(P>0.005)。与治疗前比较,龙鳖胶囊组和塞来昔布组的VAS评分、Lequesne旨数、关节炎影响测定量表评分均较前明显改善,差异均有统计学意义(P<001)。治疗后组间比较,龙鳖胶囊组和塞来昔布组在VAS评分、Lequesne旨数方面差异均无统计学意义(P>005)；龙鳖胶囊组的关节炎影响测定量表评分低于塞来昔布组,差异有统计学意义(P<0.01)。治疗期间,龙鳖胶囊组出现胃肠道反应4例,塞来昔布组出现胃肠道反应3例,两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。3.动物实验研究造模后,造模组的膝关节肿胀度高于对照组(P<0.01)。给药2周后,与造模组及龙鳖低、高剂量组比较,龙鳖中剂量组的膝关节肿胀度消退较快(P<0.01)。给药3周后,龙鳖低、中、高剂量组的膝关节肿胀度消退均快于造模组(P<0.01),其中,龙鳖中剂量组的膝关节肿胀已消退至对照组水平(P>0.05)。给药4周后,与对照组比较,龙鳖低、中、高剂量组的膝关节肿胀度均己消退(P>0.05)。造模后,造模组的体重和胸腺指数低于对照组(P<0.05),造模组的脾脏指数与对照组比较,差异有统计学意义(P>0.05)。给药2周后,龙鳖中剂量组的体重重于对照组(P<0.05)；而龙鳖低、高剂量的体重与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。给药4周后,龙鳖低、中、高剂量的体重均重于对照组(P<0.05),而龙鳖中剂量组的体重又重于龙鳖低、高剂量组(P<0.05)。给药2周后,各组之间的脾脏指数两两比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。给药4周后,龙鳖低、中、高剂量组的脾脏指数均高于同期对照组和造模组(P<0.05)。给药2周后,龙鳖低、中、高剂量组的胸腺指数均高于同期造模组(P<0.05)。给药4周后,各组组间的胸腺指数比较,差异无统计学意义(P>0.05)。给药2周、4周后,龙鳖低、中、高剂量组的软骨结构破坏程度和滑膜炎症程度均较造模组轻,龙鳖低、中、高剂量组的膝关节滑膜组织病理评分值均低于造模组(P<0.01)。给药4周后,龙鳖中剂量组的膝关节滑膜组织病理评分值与龙鳖高剂量组比较,差异有统计学意义(P>0.05)。给药2周、4周后,龙鳖低、中、高剂量组的膝关节软骨M ankin评分值均低于造模组(P<0.01),同期龙鳖低、中、高剂量组的膝关节软骨Mankin评分值组间两两比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。造模后,造模组的IL-1 β、IL-6水平均高于对照组(P<0.01),而IL-10水平低于对照组(P<0.01)。给药2周、4周后,造模组的IL-1 β水平均高于同期对照组及龙鳖低、中、高剂量组(P<0.05)；龙鳖低、中、高剂量组的IL-1β水平均高于同期对照组(P<0.05)；龙鳖中剂量组IL-1 β水平均低于同期龙鳖低、高剂量组(P<0.05)。给药2周、4周后,造模组IL-6水平均高于同期对照组及龙鳖低、中、高剂量组(P<0.01)；龙鳖低剂量组IL-6水平均低于同期龙鳖中、高剂量组(P<0.01)。给药2周后,龙鳖低、中、高剂量组IL-6水平均高于对照组(P<0.01)；给药4周后,龙鳖胶囊低剂量组IL-6水平与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。给药2周、4周后,龙鳖低、中、高剂量组IL-10水平均高于同期对照组和造模组(P<0.01),而其中龙鳖中剂量组IL-10水平均高于同期龙鳖低、高剂量组(P<0.01)。在滑膜组织中,给药2周、4周后,各组细胞均有MEK-3/6、p38、ATF2、 NF-κ Bp65 和 P-MEK-3/6、P-p38、P-NF-κ Bp65阳性表达,其中造模组MEK-3/6、p38、ATF2、NF-κ Bp65和P-MEK-3/6、P-p38、P-NF-κ Bp65阳性细胞百分比均高于对照组和龙鳖低、中、高剂量组(P<0.01)。给药2周、4周后,各组细胞均有P-ATF2弱阳性表达；2周后,造模组P-ATF2阳性细胞百分比高于对照组和龙鳖低、中、高剂量组(P<0.05)；4周后,各组间P-ATF2阳性细胞百分比比较,差异均无统计学意义(P>0.05)在软骨组织中,给药2周、4周后,各组细胞均有MEK-3/6、p38、NF-κ Bp65和P-MEK-3/6、P-p38、P-NF-κ Bp65阳性表达,其中造模组MEK-3/6、p38、NF-κ Bp65和P-MEK-3/6、P-p38、P-NF-κ Bp65阳性细胞百分比均高于对照组(P<0.01),龙鳖低、中、高剂量组MEK-3/6、p38、NF-κ Bp65和 P-MEK-3/6、P-p38、P-NF-κ Bp65阳性细胞百分比均低于造模组(P<0.05)。给药2周、4周后,各组细胞均有ATF2和P-ATF2弱阳性表达,且造模组ATF2和P-ATF2阳性细胞百分比均高于对照组(P<0.01)；给药2周后,龙鳖低、中、高剂量组ATF2阳性细胞百分比均低于造模组(P<0.01);给药4周后,龙鳖低、中、高剂量组ATF2阳性细胞百分比与造模组比较,差异无统计学意义(P>0.05)；给药2周、4周后,龙鳖低、中、高剂量组P-ATF2阳性细胞百分比均低于造模组(P<005)。结论：1.循证医学研究补肾活血中药是治疗膝骨关节炎的有效方法,不良反应较少。由于纳入文献的样本量较小、方法学质量不高,本研究的结论仍亟需更多高质量的临床随机对照试验予以支持。2.临床研究采用龙鳖胶囊和塞来昔布治疗膝骨关节炎,均可有效缓解症状、改善膝关节功能,具有良好的有效性和安全性；但龙鳖胶囊在改善生活质量方面优于塞来昔布。3.动物实验研究龙鳖胶囊能消除膝骨关节炎大鼠的膝关节肿胀,抑制造模引起的大鼠体重下降,增加膝骨关节炎大鼠的体重和脾脏指数,使造模降低的胸腺指数恢复至正常水平,可减轻膝骨关节炎大鼠软骨结构破坏的范围和严重程度,显著减轻滑膜炎症,并具有促进软骨细胞增生的作用。实验表明,龙鳖胶囊缓解膝骨关节炎大鼠炎症反应与其增强大鼠免疫器官的功能密切相关。龙鳖胶囊可增强膝骨关节炎大鼠免疫器官的功能,降低血清炎性细胞因子IL-1β、IL-6的表达水平和升高抑炎细胞因子IL-I0的表达,抑制过度亢进的p38MAPK和NF-κB信号,抑制骨关节炎滑膜和软骨细胞中p38MAPK和NF-K B信号通路的活化,是龙鳖胶囊发挥治疗作用的重要机制。