【摘 要】
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目的在我国原发性肝细胞性肝癌仍然是比较常见的恶性肿瘤,各种原因引起的肝硬化及未经正规抗病毒治疗的慢性乙型肝炎患者较多,全球肝癌每年的总发病例数和死亡例数有约50%源自中国。同时因肝癌的恶性程度高,放化疗效果不佳,术后转移和复发率高,预后差等因素严重增加疾病所带来的经济和社会负担。肝细胞性肝癌发病早期以根治性手术治疗为主,但中晚期患者往往得不到有效的治疗,而随着相关研究的进行,肝癌的免疫治疗取得了明
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目的在我国原发性肝细胞性肝癌仍然是比较常见的恶性肿瘤,各种原因引起的肝硬化及未经正规抗病毒治疗的慢性乙型肝炎患者较多,全球肝癌每年的总发病例数和死亡例数有约50%源自中国。同时因肝癌的恶性程度高,放化疗效果不佳,术后转移和复发率高,预后差等因素严重增加疾病所带来的经济和社会负担。肝细胞性肝癌发病早期以根治性手术治疗为主,但中晚期患者往往得不到有效的治疗,而随着相关研究的进行,肝癌的免疫治疗取得了明显的成效,但临床试验的失败使我们对肝癌患者的免疫耐受提出了想法,本实验主要研究肝癌患者外周血调节性T细胞(CD4+CD25+CD127low)在CD4+T淋巴细胞亚群的百分比分布情况,探究其于肝癌患者临床特征的相关性,以期为肝癌的免疫治疗提供新的思路。方法（1）流式检测我科确诊肝癌患者外周血各种免疫细胞分布情况:收集我科确诊为肝细胞性肝癌患者肘静脉血于经肝素钠预处理过真空试管内,并立即进行抗原抗体特异性结合过程,在流式细胞仪特定的模式下对荧光抗体染色样品处理,获取、分析和保存结果,最终得出不同肝癌患者CD4+T淋巴细胞群CD4+CD25+CD127表达情况,并对CD4+CD25+CD127low细胞/CD4+T在肝癌中的表达增加与临床特征进行相关性分析。（2）临床资料的获取:将符合纳入标准的肝细胞性肝癌患者临床资料收集（2018年8月至2020年5月安徽医科大学第二附属医院肝胆外科收治确诊）,并与（1）中的检查匹配,共103例,病例资料:一般资料（性别,年龄,体重,血压,糖尿病等）;既往病史（腹部手术史,感染病史,免疫治疗史等）和未经治疗前实验室检查（血常规,肝功能,凝血功能,乙肝病毒表面抗原,AFP值等）;术后病理情况（肝硬化,包膜完整性,肿瘤数目,肿瘤直径,血管侵犯,门静脉栓子等）。（3）统计分析:用SPSS 22.0软件对临床数据进行统计描述和分析,定量资料的描述采用（???s）,组间比较采用t检验,定性资料的描述采用绝对数或相对数,组间比较采用?2检验,单因素分析中P<0.2的因素纳入多因素Logostic回归分析模型,并采用R3.6.3软件制作Nomogram预测模型。结果（1）CD25-FITC和CD127-PE筛选出CD4+CD25+CD127low细胞/CD4+T正常范围:4.29-6.17%;（2）基于正常人群的CD4+CD25+CD127low细胞/CD4+T百分比范围,纳入研究的肝癌患者CD4+CD25+CD127hi细胞/CD4+T非增高组83（81%）例,增高组20（19%）例、CD4+CD25+CD127low细胞/CD4+T非增高组82（80%）例,增高组21（20%）例;（3）研究的103例病例中,最小年龄22岁,最大年龄86岁,平均年龄:59.0?11.7岁;单因素分析发现甲胎蛋白与CD4+CD25+CD127low细胞/CD4+T增高相关（P<0.05）,与Hbs Ag、HBV-DNA、肿瘤数目、肿瘤直径、肝硬化、门脉癌栓等因素无关;（4）将单因素中P<0.2变量纳入多因素Logostic回归分析模型,结果显示:CD4+CD25+CD127low细胞/CD4+T的增高与甲胎蛋白阴性、肝硬化,多发肿瘤呈正相关。（5）Nomgram预测模型结果:肿瘤直径越大,数目越多合并同时合并肝硬化,伴有HBV-DNA<1000、抗病毒治疗干预等条件的情况下,则预示着在HCC患者中CD4+CD25+CD127low细胞/CD4+T增高的概率越大;而AFP值越高,则预示着在HCC患者中CD4+CD25+CD127low细胞/CD4+T增高的概率越小。结论AFP阴性、肿瘤单发、肝硬化的HCC患者CD4+CD25+CD127lowT细胞/CD4+T明显增高,与其预后不良相关。
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