股骨头再造、TGF-β1在关节软骨化生中发挥作用的研究

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目的:本研究制备液氮冷冻股骨头缺血性坏死的动物模型,切除股骨头坏死部分并转移自体带血管蒂的大转子骨瓣进行股骨头再造,于术后不同时间段观察分析大转子骨瓣表面骨膜及腱膜等纤维结缔组织向关节软骨转化的规律及转化生长因子-β1(TGF-β1)在软骨化生过程中发挥的生物学作用。方法:取8~12个月龄的比格犬40只,体重7~10kg,均采用双侧后肢自体对照,制备液氮冷冻双侧股骨头缺血性坏死的动物模型,随机分为二组,每组20只。右侧股骨头造模后即缝合关节囊,左侧股骨头根据分组不同采用不同的处理方式:A组(骨瓣治疗组):左侧切除股骨头液氮冷冻坏死区域后转移带旋股外侧血管横支血管蒂大转子骨瓣进行股骨头再造;B组(骨瓣加rAAV2-TGF-β1基因治疗组):左侧股骨头带血管蒂大转子骨瓣股骨头再造,关节内注入表达TGF-β1的腺病毒载体;两组动物分别于3,6,12,20,32周每批4只处死,对骨瓣进行大体观察,组织病理学观察,免疫组化及实时荧光定量RT-PCRmRNA检测。结果:所有动物右侧冷冻区组织坏死,纤维状物覆盖,碎片样组织修复。组织病理切片及Ⅰ,Ⅱ型胶原蛋白的免疫组化证实A组左侧骨瓣区自6周出现软骨细胞,且逐周增多,B组左侧骨瓣区自3周出现软骨细胞,RT-PCRmRNA检测均为阳性表达,随时间推迟阳性表达越强。经统计学处理P<0.05有统计学意义。结论:大转子表面的骨膜及腱膜能够向关节软骨化生,TGF-β1基因可阳性表达,TGF-β1对大转子表面的骨膜及腱膜向关节软骨化生有促进作用,为股骨头缺血性坏死的纤维外科治疗及生长因子的应用提供基础。
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