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本文利用DA201-C大孔吸附树脂对草鱼活性肽进行脱盐处理,比较处理前后灰分、肽含量、分子量、氨基酸组成、对血管紧张素转化酶(angiotensin I-converting enzyme, ACE)的抑制活性及抗氧化性的变化。对脱盐后草鱼活性肽进行体外血管紧张素转化酶抑制活性的检测及体内降血压效果的评价。利用人结肠类腺癌细胞(the human colon carcinoma cell line, Caco-2)单层模型对从草鱼肽中纯化的三肽、/al-Ala-Pro (VAP)的合成体进行模拟小肠上皮组织的吸收。利用DA201-C大孔吸附树脂对草鱼肽进行脱盐,室温下以10mg/mL的浓度上样吸附,经过洗脱、浓缩干燥后,其灰分减少为3.89%,脱盐率为82.02%；肽含量由62.07%增大为89.35%；草鱼肽得到浓缩,分子量集中在400-900Da；其疏水氨基酸得到有效富集,由272.6mg/g增大到338.2mg/g,占总氨基酸的44.15%。脱盐处理后,ACE抑制活性显著提高,半抑制浓度(IC50)由0.34变为026mg/mL;对DPPH自由基的清除率增强,其IC50由5.89变为4.5Omg/mL;总抗氧化能力增大,总抗氧化(Ferric reducing antioxidant potential Assay, FRAP)值由1.018增大到1.261。高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)检测草鱼活性肽体外ACE抑制活性,马尿酸(hippurie acid, HA)口马尿酞组氨酞亮氨酸(Hippuryl-His-Leu, HHL)的保留时间分别为9.899min和10.522min,分离良好,检测线为3.125μg/mL,精密度RSD为1.71%,加样回收率为99.5%,方法可行、可靠。体外草鱼肽对ACE抑制活性的IC50为0.26mg/mL。以原发性高血压大白鼠(Spontaneously Hypertensive Rats, SHR)和正常血压京都大鼠(Wistar Kyoto Rats, WKY)为模型,对草鱼活性肽进行体内降压效果的评价。一次灌胃实验中,给药6-9h后,SHR各组血压达最低值,其中最高剂量组GCP (100mg/kg)最大降幅为30mmHg,与阳性对照卡普托利无显著性差异(p>0.05)。长期实验中,以高中低剂量GCP及卡普托利每天灌胃大鼠,一周后,SHR各组血压明显降低,且呈现剂量和时间依赖关系,4w后,GCP高剂量组(100mg/kg)、中剂量组(50mg/kg)、低剂量组(20mg/kg)血压降幅分别为20.7,14.0和72mmHg。卡普托利能显著降低WKY大鼠血压,而GCP最高剂量对其血压也没有影响。6w后,SHR血浆中ACE活性及血管紧张素Ⅱ(Angiotensin Ⅱ, Ang Ⅱ)浓度随着给药剂量的增大而逐渐降低。肾素(renin,RA)和一氧化氮(nitric oxide,NO)的浓度与给药剂量呈负相关趋势,其中,高剂量组的RA和NO水平与阴性对照已有显著性差异(p<0.05)。结果表明草鱼活性肽降血压机制与肾素-血管紧张素系统(Renin-Angiotesin System, RAS)和NO的调节有关。在本实验室建立Caco-2细胞单层模型模拟GCP在小肠中的吸收。实验期内(21d),细胞跨膜电阻(Transepithelial electrical resistane, TEER)上升为385Q/cm2,表明其细胞紧密型良好。顶侧(Apical, AP)和底侧(Basolateral, BL)碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, AKP)活性比扩大为1：1.3,且AKP已多集中于刷状缘(AP),与小肠类似。荧光素钠表观渗透系数(Apparent permeability, Papp)为0.67×10-6cm/s,在参考值的范围之内,细胞渗透性良好。利用此模型模拟从草鱼肽中纯化出的三肽、/al-Ala-Pro (VAP)的合成物的小肠吸收,上样浓度为lmg/mL,渗透系数为7.66×10-6cm/s,吸收率是20%-70%,属于吸收中等药物。