【摘 要】
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目的:在军事训练中,过度训练导致急性肾损伤(overtraining-induced acute kidney injury,OTIAKI)事件常常发生,若不及时治疗可进展为不可逆性肾损伤,甚至死亡。其机制尚未明确。因此,研究其发病机制,对治疗肾损伤、提高生存质量有重大意义。本研究旨在采用大鼠无负重单次游泳至力竭建立过度训练引起急性肾损伤模型,拟评价OTIAKI时肾组织中巨噬细胞的分化趋势及其机制
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目的:在军事训练中,过度训练导致急性肾损伤(overtraining-induced acute kidney injury,OTIAKI)事件常常发生,若不及时治疗可进展为不可逆性肾损伤,甚至死亡。其机制尚未明确。因此,研究其发病机制,对治疗肾损伤、提高生存质量有重大意义。本研究旨在采用大鼠无负重单次游泳至力竭建立过度训练引起急性肾损伤模型,拟评价OTIAKI时肾组织中巨噬细胞的分化趋势及其机制,为临床治疗提供理论支持。方法:1.雄性Wistar大鼠35只,200-220 g,按随机数字表分成三组:正常对照组(Control,CN,n=5),单纯力竭运动组(acute kidney injury,AKI,n=15),眼镜蛇毒因子干预组(Cobra venom factor,CVF,n=15)。除CN组,各组按力竭后时间分为即刻、6h、24h组,5只/组。2.力竭后麻醉,下腔静脉采血,抗凝管储存待测。摘双肾,左肾EP管-80℃保,右肾多聚甲醛4℃保存,待测。3.光镜观察肾结构病理改变。4.生化仪检测BUN、Cr。5.Western blot、免疫组化检测CD68、CD163。6.统计:IBM SPSS21.0进行统计,均数±标准差(x±s)表示。组间比较采用单因素方差分析(one-way ANOVA),P<0.05为检验水准。结果:1.生化指标:AKI组Cr和BUN水平较CN组增高(P<0.05)。CVF组较AKI组同期降低(P<0.05),但高于CN组(P<0.05)。2.病理变化:CN组结构完整。AKI、CVF组即刻、6 h组肾结构轻度病理改变;24 h组改变明显。3.肾小管损伤评分:较CN组,AKI评分增高(P<0.05)。较AKI组,CVF同期评分降低(P<0.05)。4.Western blot:CN组CD68、CD163低表达;AKI、CVF组CD68/β-Actin、CD163/β-Actin较CN组升高(P<0.05)。CVF组CD68/β-Actin较同期AKI组降低,CD163/β-Actin较同期AKI组升高(P<0.05)。5.免疫组化:CN组CD68、CD163低表达;AKI、CVF组CD68、CD163阳性细胞率较CN组升高(P<0.05)。CVF组CD68阳性细胞率较同期AKI组降低,CD163阳性细胞率较同期AKI组升高(P<0.05)。结论:1.力竭游泳后大鼠肾脏CD68表达增强,CD68为巨噬细胞的标志物,提示巨噬细胞参与了OTIAKI损伤进程。2.CD68在肾脏损伤早期表达增强,随后减弱,而CD163表达进行性增强。推测M1型巨噬细胞参与了OTIAKI早期的损伤进程,M2型巨噬细胞可能在OTIAKI的后期的组织重建中发挥作用。3.蛇毒因子干预组CD68表达量低于AKI组相同时间点,CD163表达量均高于于AKI组相同时间点。结果提示巨噬细胞的极化及作用部分受补体的影响。
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