二苯醚降解菌的筛选及其降解特性的研究

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二苯醚是由一个氧原子连接两个苯环所形成的芳香族化合物,由氯苯与苯酚在碱溶液中,以铜为催化剂缩合而得。工业生产中,将二苯醚和溴素在催化剂的作用下,在苯环上加溴取代,将这类人工合成的化合物称为多溴联苯醚(PBDEs)。作为一种主要的溴代阻燃剂(Brominated flame retardants,BRFs), PBDEs的阻燃效率高,热稳定性好,添加量少,并且对材料的性能影响小,价格便宜,因此被广泛应用于各种工业产品中,包括纺织品、电子电气设备、建筑装饰材料、聚氨酯泡沫、电缆线、汽车座椅、地毯和印刷电路板等。环境中的多溴联苯醚会积累下来,因为这类化合物的化学性质很稳定,很难在环境中被降解。研究表明高溴代的PBDEs在紫外光下会发生脱溴反应,产生毒性更强的低溴代的PBDEs。研究表明溴代阻燃剂会影响动物的神经系统的发育,其记忆以及学习能力都会受到影响。PBDEs还会影响甲状腺激素以及女性荷尔蒙激素的分泌。传统的物理化学方法处理极易导致二次污染,与其相比,生物处理法具有良好的环境兼容性和低廉的成本,因而越来越受到重视。本文以二苯醚为研究对象,从污水处理厂的活性污泥中以二苯醚为底物筛选得到二苯醚的高效降解菌株,通过研究确定菌株的最优降解条件,分别考察降解菌株以及混合培养物对二苯醚的降解规律,通过神经网络方法探究了不同的金属离子对于细菌降解二苯醚的影响,并考察了降解菌株对4-溴二苯醚以及联苯的降解情况;研究了黄孢原毛平革菌对二苯醚的降解情况,对其代谢中间产物进行鉴定,并对其降解的酶系进行研究;在实验室进行了二苯醚污染土壤的降解实验,为菌株在实际土壤修复工程中的应用提供理论依据。主要研究内容如下:(1)二苯醚降解细菌的筛选与鉴定。驯化并筛选到一株能够以二苯醚为唯一碳源生长的菌株DZ-3。除此之外,还筛选到一株菌CZ-3,不能对二苯醚进行降解,但是CZ-3与DZ-3的混合培养物能够极大地提高对二苯醚的降解效率。对这两株菌进行16SrDNA鉴定,分别隶属于鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas)以及苍白杆菌属(Ochrobactrum)。(2)降解细菌对二苯醚降解特性的研究。研究发现,在无机盐培养基中,DZ-3在4d内对初始浓度为835mg/L的二苯醚的降解率为52%,6d内为71%,而DZ-3与CZ-3以2:3的比例接种后,在4d内对二苯醚的降解率达到90%。本文还利用神经网络的方法分析了无机盐中各种金属离子对DZ-3降解二苯醚效率的影响,为实际的修复提供理论基础。研究还发现,DZ-3能以联苯以及4-溴二苯醚为唯一碳源生长。(3)黄孢原毛平革菌对二苯醚的降解特性。黄孢原毛平革菌为本实验室筛选得到的的一株白腐真菌,论文研究了其对二苯醚的降解情况。研究发现,该菌能够降解二苯醚,6d内对初始浓度为200mg/L的二苯醚的降解效率为93.4%,其代谢产物为4-羟基二苯醚。实验证明,4-羟基二苯醚对真菌的细胞活力具有毒害作用,使细胞的活力大大降低。对催化二苯醚羟基化的酶系进行研究,通过P450抑制剂的方法证明P450催化了二苯醚降解。(4)DZ-3以及真菌对二苯醚污染土壤的生物修复研究。将筛选得到的降解细菌以及真菌应用于土壤中二苯醚的降解,研究了其降解特性,为实际污染土壤的微生物原位修复提供了实验基础。实验证明,在添加麸皮的条件下,细菌培养物以及细菌和真菌的混合物在6d内对土壤中的二苯醚的降解率均能达到98%,而真菌对二苯醚的降解率在6d内达到40%。
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