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目的:运用荧光定量RT-PCR技术检测Holliday交叉识别蛋白(Holliday Junction Recognition Protein,HJURP)在原发性肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)组织和癌旁组织中的表达情况,探讨HJURP mRNA在HCC中表达的意义,并分析其与各临床病理参数以及患者术后复发转移时间的关系,为肝癌术后复发的综合治疗提供科学依据。方法:取2007年3月至2013年12月期间在广西医科大学附属肿瘤医院肝胆外科施行根治术的73例HCC患者术后肿瘤组织,并取距手术切缘> 1cm的癌旁组织21例作为对照(其中19例有对应癌组织及癌旁组织),所有患者术前未进行任何抗肿瘤治疗,排除合并其他肿瘤及病理诊断为非肝细胞癌者。收集73例病例的一般临床资料及病理资料包括性别、年龄、家族史、血清学指标、肿瘤大小、肿块数目、有无脉管癌栓、临床分期等,并进行随访。应用荧光定量RT-PCR法检测肝癌组织和癌旁组织中的HJURP mRNA表达状况,Western blot法检测肝癌及癌旁组织中HJURP蛋白表达情况。采用SPSS16.0统计软件进行数据分析,HJURP mRNA与HCC临床特征的关系用χ2检验(chi-square test)及Fisher确切概率法分析;单因素生存分析采用Kaplan-Meier法进行;Cox比例风险回归模型对可能影响HCC患者预后的因素进行多因素分析。以P<0.05为显著性水准。结果:1、随访时间截止至2016年3月11日,总共随访73例肝癌根治术患者,随访时间最长者为94个月,最短6个月,中位随访时间36个月。44例出现复发,复发率60. 3%,中位复发时间17个月,均为肝内复发。2、根据HJURP mRNA在肝癌组织中相对表达量数值的中位数为界,将73例肝癌病例分为高表达组和低表达组。73例HCC组织中HJURP mRNA相对表达量的中位数为1.17, 21例癌旁组织中HJURP mRNA相对表达量的中位数为0.15,差异有统计学意义(P<0.05)。73例HCC组织中,有37例肝癌组织HJURP mRNA呈高表达,高表达率为50. 7% (37 / 73); 21例癌旁组织中,有1例HJURP mRNA高表达,高表达率为4. 8(1 / 21), HCC组织HJURP mRNA表达显著高于癌旁组织,19例HCC组织中HJURP mRNA高表达率明显高于对应的癌旁组织(P<0. 05) 。3、在不同的性别、年龄、肝癌家族史、乙肝两对半各指标、肝硬化、肿块数目、血管侵犯、BCLC分期、TNM分期等分组之间,HJURP mRNA表达均无统计学意义(均P>0. 05);但HJURP mRMA在HCC中的表达与术前血清ALT、术前AST、术前AFP水平、肿块大小、有无脉管癌栓等有关,差异有统计学意义(P<0.05)。4、73例HCC患者术后复发时间≤6M组、6.1M～12M组、12. 1M～18M组、18.1M～24M组和>24M组HJURP mRNA高表达率分别为35. 7%、66.7%、75.0%、25%、50.0%,HJURP mRNA的高表达率差异无统计学意义(P>0. 05)。复发转移时间在≤6M组与>6M组,≤12M组与>12M组,≤18M组与>18M组,≤24M组与>24M组,≤6M组与>12M组,≤6M组与>18M组,≤6M组与>24M组,≤12M组与>18M组,≤12M组与>24M组,≤18M组与>24M组,≤12M组、12.1M～24M与>24M组,12.1M～24M组与>24M组,其HJURP mRNA高表达率差异均无统计学意义(均P>0.05)。5、单因素分析显示肿瘤直径>5CM、TNM分期是影响肝癌根治术后复发时间的危险因素(P<0. 05)。肿块>5CM组的中位复发转移时间为11. 0个月,显著短于相应对照组31. 5个月,差异有统计学意义(P<0. 05); TNM分期中,Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期的中位复发时间分别为20.0个月、17.0个月和6.0个月,差异有统计学意义(P<0. 05); HJURP mRNA高表达组中位复发转移时间为15.0M,而HJURP mRNA低表达组为22.0M,但差异无统计学意义(P>0.05)。其余性别、年龄、家族史、饮酒、肝硬化、术前AFP、术前ALT、术前AST、肿块数目、血管侵犯、脉管癌栓、BCLC分期等各组病例与HCC出现复发转移时间均无统计学意义(P>0. 05)。6、Cox模型多因素分析显示,肿块大小是影响HCC患者术后复发转移时间的独立危险因素。结论:1、HJURP mRNA在HCC组织及癌旁组织中的表达水平具有显著差异,HCC组织中HJURP mRNA表达水平明显高于癌旁组织。2、HJURP mRNA的表达与性别、年龄、家族史、乙肝两对半各指标、术前AFP、肿块数目、血管侵犯、BCLC分期、TNM分期等均无关;与术前ALT>40U/L、术前AST>40U/L、术前AFP>400g/L、肿块>5CM及脉管癌栓等有关。3、HJURP mRNA表达情况与肝癌术后复发转移时间无关。4、肿块大小(P<0. 05)是影响HCC术后复发转移时间的独立危险因子。