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糖尿病的并发症多,最为典型的是皮肤溃疡,寻找糖尿病性皮肤溃疡的促愈方法,成为亟待解决的问题。研究表明,创面局部应用胰岛素对患者血糖影响不大,但能够显著加速创面愈合,改善创面愈合质量。然而,胰岛素在血液中易被蛋白酶水解或失活,并且过高浓度的胰岛素会对人体产生危害。因此,寻找合适的药物释放载体至关重要。本文采用同轴高压静电分化技术制备载胰岛素的丝素微球,研究微球的表面形貌与内部结构,分析胰岛素的释放动力学,探讨微球制备对胰岛素生物活性的影响。进一步,采用冷冻干燥的方法将微球装于丝素多孔支架中用于胰岛素的局部缓释。首先,采用同轴高压静电分化和冷冻干燥相结合的技术制备了载胰岛素的丝素微球。用扫描电镜(SEM)观察了微球的表面形貌及内部结构。结果表明,收集距离固定为12cm、电压为13kV、溶液的理论浓度为1.75wt.%、总推进速度为0.4ml/h的条件下,同轴法和共混法载药的微球平均直径均为93μm左右,且表面带有小孔。微球内部存在大量的纳米球,部分纳米球之间由纳米线连接,内部球的尺寸在几百纳米到一微米左右。丝素溶液浓度增大时,纳米球消失,说明丝素溶液的浓度对微球的内部结构起到主导作用。同轴法和共混法制备的载药微球的载药率均为16.7%,吸附法制备的载药微球对应的载药率为5.5%。红外光谱(FTIR)和X-射线衍射(XRD)测试结果表明,微球的制备对胰岛素的二级结构含量基本不产生影响。圆二色(CD)测试结果进一步表明,从微球中释放出的胰岛素的空间构象与载入前无明显差异。其次,采用荧光标记的方法检测胰岛素的释放曲线,结果表明,吸附法载药微球出现突释现象,胰岛素在8h内基本完全释放。同轴法和共混法载药的微球能够持续释放15d左右,载药率相同时,同轴法载药的微球比共混法有更高的药物包封率和释放量,且能更好地维持药物活性。用扫描电镜(SEM)观察了同轴法载药的微球释放28d后的形貌,结果显示,随着药物释放的进行,微球表面大量的孔洞出现,使得微球内部的药物更容易释放。支架的药物释放速率比微球更加趋于平稳。利用冷冻干燥技术制备了装载微球的丝素多孔支架,扫描电镜(SEM)观察结果显示,浸泡法能够将微球固定在支架的表面。共混法的载球率较低,经冷冻干燥后,大多数微球会从支架中脱落,只有少量微球被装载到支架底面。分层共混法制备的支架中,微球较均匀的分布在支架的中上层。层层组装法能够将微球较为均匀地固定在微球的内部。最后,分别采用划痕法和CCK-8检测法研究了微球释放的胰岛素对人永生化表皮细胞HaCaT和人脐静脉内皮细胞EA.hy926的迁移和增殖的影响。结果表明,从微球中释放出的胰岛素保持了良好的生物活性,能够刺激HaCaT细胞和EA.hy926细胞迁移与增殖。本文首次采用同轴高压静电分化技术制备了装载胰岛素的丝素微球,并且成功将微球装载到支架中。研究结果表明,从微球中释放出的胰岛素的二级结构基本保持不变且具有良好的生物活性,为实现局部缓释胰岛素以促进伤口愈合提供了有效的手段。