论文部分内容阅读
研究背景:CD4+T细胞功能失常导致的免疫性疾病发病率逐年增加,如系统性红斑狼疮、溃疡性肠炎等。CD4+T细胞功能异常有多种诱因,抗原提呈细胞是最主要因素。树突状细胞是目前已知最主要的抗原提呈细胞,能够吞噬抗原,加工处理,将抗原信息提呈给T、B细胞,从而激活机体的免疫应答。p38 MAPK信号通路作为MAPK信号通路的一个重要分支,调控细胞的生长、活化、增殖和凋亡。SB203580是p38 MAPK的特异性抑制剂,抑制其信号转导。本文将研究SB203580对树突状细胞的表型和功能的影响及可能机制。目的:探讨阻断p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路对脾脏树突状细胞(DC)介导的CD4+-鸡卵清蛋白转基因小鼠T(OT-Ⅱ)细胞增殖和分化的影响。方法:1应用CD11c+免疫磁珠分选C57BL/6小鼠脾脏中DC。2应用CD4+分离试剂盒从OT-Ⅱ转基因小鼠脾脏中分选出OT-Ⅱ细胞。3采用流式细胞术检测DC表面共刺激分子(CD80、CD86、CD40)、MHCⅡ分子的表达。4流式细胞术检测DC提呈组织相容性复合体Ⅱ类分子Eα链第52~68位抗原肽(Eα52-68)的能力。5 ELISA法及实时荧光定量PC R检测DC肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素1α(IL-1α)、IL-6、转化生长因子β(TGF-β)的蛋白水平和mRNA水平。6流式细胞术检测DC介导的OT-Ⅱ细胞增殖及Th1/Th2/Th17和抑制性细胞比例。结果:1经磁珠分选后获得了较高纯度的DC(>90%)。2经分选试剂盒分选后获得叫高纯度的OT-Ⅱ细胞(>90%)。3 SB203580降低DC表面CD80、CD86、CD40、MHC-Ⅱ的表达。4 SB203580抑制DC的抗原提呈反应。5 SB203580使DC细胞的TNF-α、IL-1α、IL-6表达下调,TGF-β表达上调。6 SB203580抑制DC介导的OT-Ⅱ细胞增殖,减少Th17细胞比例,增加抑制性细胞比例。结论:SB203580阻断p38MAPK信号通路,可能通过调控DC表面CD80、CD86、CD40、MHCⅡ的表达及其抗原提呈功能和细胞因子的合成,从而抑制DC介导的OT-Ⅱ细胞增殖及向Th17细胞的分化,促进其向抑制性细胞的分化。