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第一部分:肝癌相关基因FBXW8的功能和机制研究目的:探讨FBXW8对肝癌细胞系HepG2和Huh7细胞增殖和迁移能力的影响以及初步的分子机制。方法:通过瞬时转染将过表达FBXW8的重组质粒转染进肝癌细胞系HepG2和Huh7中;通过瞬时转染siRNA敲低HepG2和Huh7中的FBXW8;采用蛋白免疫印迹法检测HepG2和Huh7中的FBXW8蛋白的表达水平,分别验证过表达和敲低FBXW8的效果;采用实时定量PCR检测肝癌细胞系中上皮间质转化相关分子的蛋白表达水平;采用CCK-8法检测FBXW8对肝癌细胞系增殖能力的影响;采用Transwell法评价FBXW8对肝癌细胞系迁移能力的影响;采用Log-rank检验比较FBXW8高表达组和低表达组肝癌患者生存期的差异。结果:过表达FBXW8可显著抑制HepG2和Huh7细胞的增殖和迁移能力;而敲低FBXW8则可显著促进HepG2和Huh7细胞的增殖和迁移能力。过表达FBXW8可显著抑制肝癌细胞EMT过程;而敲低FBXW8则显著促进肝癌细胞的EMT过程;临床相关性分析显示,与癌旁组织相比,FBXW8在肝癌组织中表达显著降低,且FBXW8的低表达水平与肝癌患者的不良预后显著相关。小结:FBXW8可显著抑制肝癌细胞的增殖、EMT过程和迁移能力,是潜在的肝癌抑癌基因。第二部分:肝癌相关基因RTEL1的功能和机制研究目的:探讨RTEL1对肝癌细胞系HepG2和Huh7细胞增殖和迁移能力的影响。方法:通过瞬时转染将过表达RTEL1的重组质粒转染进肝癌细胞系HepG2和Huh7;采用siRNA瞬时转染以敲低HepG2和Huh7细胞中的RTEL1;采用Western Blot实验检测HepG2和Huh7细胞中RTEL1蛋白的表达水平,以分别验证过表达和敲低RTEL1的效果;采用CCK-8法检测RTEL1对肝癌细胞增殖能力的影响;采用Transwell法评价RTEL1对肝癌细胞迁移能力的影响。结果:过表达RTEL1可显著促进HepG2和Huh7细胞的增殖和迁移能力;而敲低RTEL1则可显著抑制HepG2和Huh7细胞的增殖和迁移能力。小结:RTEL1可显著促进肝癌细胞的增殖和迁移能力,是潜在的肝癌癌基因。