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西瓜枯萎病是我国瓜类作物最常见病害之一,它的发生导致西瓜产量以及品质的降低,造成了极大的经济损失,严重限制西瓜优质丰产和生产地域的发展。目前控制它的病害是通过化学合成农药的方法,但是它容易流失到环境中,土壤易形成板结,对人、环境与动物容易造成非常严重的危害。现今有越来越多的国内外学者大量的研究植物源杀菌剂,植物源杀菌剂是植物自身产生的次生代谢物,它通过对病原菌产生防御机制,并在这个过程中产生的多种抑菌物质,为生物杀菌剂提供更多的信息和合成模板,更最重要的是,它对环境、水、动物与人类无害或较小的危害,因此,利用植物提取物制成的药剂更加环保和安全有效。前期研究发现,茼蒿提取物中含有抑制西瓜枯萎病菌的活性物质,本实验是通过对其抑菌物质的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度,响应面法优化提取工艺,初步抑菌机理的探究,以及抑菌谱进行初探。主要的研究结论如下:1、利用生长速率法,将茼蒿提取物二倍稀释,在PDA培养基下测定其抑菌活性。结果表明,茼蒿提取物对西瓜枯萎病具有一定抑制作用,以不同有机溶剂萃取,正丁醇萃取的效果最好,其粗提物抑菌率达到了97.5%。最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MFC)分别为125 mg/m L和500 mg/m L,通过毒力方程的测定,它的半抑菌浓度(EC50)为206 mg/mL。并以0、MIC、EC50和MFC的四种浓度粗提物对西瓜枯萎病菌孢子萌发的研究,在MFC浓度下的孢子萌发率最低。2、采用超声波提取茼蒿活性物质,通过单因素试验和响应面优化分析法比较了乙醇浓度、提取温度、料液比和提取时间对提取茼蒿抑菌物质的影响,并优化其提取工艺参数。结果表明:固定乙醇浓度为95%,各自变量对茼蒿抑菌物质提取率的主次关系为:X3(温度)>X2(料液比)>X1(提取时间)。超声波提取的响应面最佳优化工艺为:提取时间103 min,液料比26 mL·g-1,温度35℃,模型预测值为46.28%,实际平均值为45.56%,实际值与预测值的吻合度达到98.44%。3、以0、MIC、EC50和MFC为设置浓度,通过测定培养液的电导率、菌丝中总糖含量、蛋白质含量、核酸泄露和总DNA的提取验证以及菌丝干湿重的变化,进行抑菌机理的初步分析。结果表明,加入茼蒿提取物的菌悬液,电导率明显增大,其中浓度为EC50时的液体培养基中相对电导率最大,达到0.27 ms/cm;培养一段时间的菌丝总糖和可溶性蛋白质含量均下降,此外,菌丝生物量也明显下降,湿重较对照减少64.34%,干重较CK对照减少78.63%;将菌丝中总DNA的提取并且通过琼脂糖凝胶电泳分离,结果显示经过茼蒿提取液处理后菌丝DNA电泳条带与对照组并没有差异,因此可能菌丝中DNA没有泄漏或者降解现象。4、将0.5 g/mL的茼蒿提取液利用二倍稀释法配制成浓度梯度,对9种常见植物病原真菌的抑菌活性测定,得到病原菌的毒力方程、EC50、相关系数r和置信区间。其结果表明,茼蒿提取液对9种植物病原菌的抑菌作用由大到小的顺序依次为:辣椒疫霉菌、莴苣菌核核盘菌、水稻纹枯菌、枣拟茎点霉菌、葡萄座腔菌、猕猴桃灰霉菌、盘多毛、猕猴桃拟茎点霉菌和柑橘青霉。对辣椒疫霉菌、莴苣菌核核盘菌两种真菌的活性最强,它们的EC50分别为为76.87 mg/mL和91.770 mg/mL,说明茼蒿提取液对这两种真菌比较敏感,抑菌活性最强。利用气相色谱-质谱联用仪检测出茼蒿中主要成分化合物,共发现49种化合物,其中内酯类和酮类化合物分别含15种和9种,相对含量达到3.3%和3.92%,醇类占7种,相对含量1.91%;酸占3种,相对含量0.09%;烯、醛和酚各占1种,相对含量分别为0.8%、0.03%、0.01%,这说明茼蒿中的内酯类与酮类很可能是对西瓜枯萎病菌有抑菌活性的有效成分。