论文部分内容阅读
新城疫(Newcastle disease, ND)是由新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)引起的一种急性、高度接触性禽类传染病,对养禽业造成的损害十分严重,被国际兽医局定为Ⅰ类传染病。对于ND的预防免疫接种,常用的疫苗是传统的弱毒活疫苗和灭活疫苗,但二者在实际应用中均具有一定的局限性。弱毒苗由于变异等易产生毒力返祖；灭活苗起效慢,免疫保护期短。因此,如何提高ND疫苗的免疫效果是疫苗免疫研究中迫切需要攻克的课题,剂型的改造是提高ND疫苗免疫效果的方法之一。目前,正在发展的纳米粒黏膜免疫递送系统是解决上述问题的最有希望的途径之一。本试验研究选用生物可降解材料壳聚糖为载体,以鸡新城疫减毒活疫苗为模型药物,采用离子交联法制备鸡新城疫减毒活疫苗壳聚糖纳米粒(NDV-Chs-NPs),并对纳米粒的处方、工艺及影响因素、理化特性、药物稳定性等进行了较为系统的研究；同时,通过Western blotting考察了NDV-Chs-NPs中NDV结构蛋白的抗原性；通过细胞毒性试验和安全检验评价了NDV-Chs-NPs黏膜免疫递送系统的安全性；通过效力检验和攻毒试验考察了其在鸡体内的免疫效果。试验结果表明,采用本试验筛选出的工艺制备出了大小均一、形态规则、外形圆整、分散性好的NDV-Chs-NPs,平均粒径为371.1nm, Zeta电位为+2.84mV,包封率为(74±3.7)%；Western blotting试验结果表明,NDV被壳聚糖包裹后,NDV结构蛋白没有受到破坏,保持了生物学活性；体外释放试验结果表明,NDV-Chs-NPs具有稳定缓释NDV的作用；鸡体内免疫接种试验结果表明,采用制备的NDV-Chs-NPs免疫后可刺激机体产生较强的体液免疫和细胞免疫,保护效力优于新城疫常规弱毒苗；细胞毒性试验和安全检验结果表明,NDV-Chs-NPs的毒性较小,NDV-Chs-NPs黏膜免疫递送系统具有较高的安全性。本试验研究可实现疫苗在体内的长效作用机制,从而达到降低免疫用药成本、减少免疫次数、增加免疫途径的目的。同时,也可为鸡新城疫疫苗在临床的广泛应用提供一个免疫效果好和安全性能高的黏膜免疫递送系统。