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在SCI后的继发性损伤过程中，损伤区及邻近区域细胞凋亡机制起着重要的作用。凋亡不仅会直接导致细胞死亡，也是损伤区域继续扩大和损伤区远旁幸存轴突长期延迟性脱髓鞘变性的主要原因所以我们有理由相信，阻断细胞凋亡的级联反应可以最大限度地减少细胞凋亡，保护幸存细胞，改善神经功能，从而达到有效的治疗措施。 核因子NF-κB因具有和某些基因上启动子区的固定核苷酸序列结合而启动基因转录的功能。在SCI的急性期，NF-κB的活化可以上调各种炎性介质因子，如：iNOS、细胞因子、趋化因子、粘附因子、蛋白水解酶等。它们的持续表达和聚集将对细胞产生毒害作用。所以以往对NF-κB的认识仅仅局限在其在炎症、应激、免疫方面的作用，直到发现NF-κB具有抑制中枢神经系统神经元的程序性细胞死亡的特点，它成为目前国内外脊髓损伤学术研究的热点。实验证实，NF-κB的活性表达可抑制中枢神经系统神经元的程序性细胞死亡，起到了抗凋亡的作用。 在完全没有TrkA的参与下，p75NTR可独立介导胞内信号传递，调控细胞凋亡这一现象后，p75NTR的研究受到举世瞩目，其最新研究成果频繁在Science和Nature等著名杂志上发表。近几年来，对p75NTR的研究更是进一步升温，因为在许多中枢神经系统疾病的发生中，p75NTR似乎都起到了关键性的作用，例如阿尔茨海默氏综合征、癫痫发作等。同时，通过对p75NTR信号传导途径的研究发现，一些信号分子参与了p75NTR引起的细胞凋亡过<WP=101>程如：ceramide、JNK、Bax、caspase、calpain等。上述研究都说明了p75NTR在介导神经细胞胞内信号传递，调控细胞凋亡方面的重要性。p75NTR在SCI后脊髓细胞内的表达分布及信号传导途径的研究，为指导继发性脊髓损伤的治疗奠定坚实的理论基础。本实验通过构建大鼠急性脊髓损伤模型，利用NF-κB的特异性抑制剂PDTC调控NF-κB的转录活性，采用western blot、RT-PCR、TUNEL及免疫组化、电镜分析、大鼠后肢功能的BBB评分等实验方法，研究NF-κB结合活性的变化对脊髓细胞凋亡过程及p75NTR表达产生的影响。深入的了解NF-κB在脊髓损伤后的表达作用机制，研究p75NTR在SCI后信号传导途径，阐明NF-κB与p75NTR的相互作用关系，对继发性脊髓损伤的治疗有着积极而重要指导意义。Crowe、Li和Liu等在SCI的研究中都发现了神经细胞凋亡这一现象，这种神经元和胶质细胞的凋亡可以解释损伤区的继续扩大和远离损伤区的幸存轴突长期延迟性脱髓鞘变性的原因。Emery等研究SCI病人的脊髓组织时，也发现了邻近损伤中心区域的白质都出现了神经细胞凋亡，和caspase-3的高度表达。在本实验中TUNEL染色和透射电镜分析发现，SCI后第7d时仍有许多凋亡的细胞，其主要由神经元和少突胶质细胞构成。caspase-3的表达分布在一定程度上可代表细胞凋亡的情况，实验发现SCI后24h时即有caspase-3的活性表达，第7d时仍维持着较高的水平。这种持续的高水平的神经细胞凋亡引起了广泛的脱髓鞘变化和轴突的破坏，对脊髓神经功能的恢复产生不利的影响。脊髓损伤后发生神经细胞凋亡这一现象是SCI研究领域中的一大进展，它使人们对SCI的认识不再局限于单纯的细胞坏死方面，细胞凋亡的发现为治疗急慢性脊髓损伤提供了新的思路和途径。研究者们很早就已发现SCI后会出现邻近损伤区域大量的细胞延迟性死亡这一现象，但未明其原因。美国的四个研究小组在研究了SCI患者脊髓时发现，损伤后期脊髓细胞的死亡并非由原发性损伤引起的坏死造成，而是细<WP=102>胞的一种程序性自杀性行为，即凋亡或程序性细胞死亡，并进一步指出细胞的凋亡是这一继发性损伤的关键。这就提示了如果能抑制细胞的凋亡就可以减轻损伤区域的扩大，减少脊髓麻痹的范围。这四个小组在大鼠SCI模型上发现，使用有抑制细胞凋亡作用的环己亚胺可明显提高大鼠后肢运动功能50%以上。同时研究还发现，大多数凋亡的细胞为构成髓鞘的少突胶质细胞。髓鞘可确保电信号沿中枢神经纤维快速传导，轴突脱髓鞘后将失去其传导冲动的能力。所以广泛的脱髓鞘变化和轴突的破坏是创伤性脊髓损伤后机体运动功能丧失的主要成因。而损伤区远旁的少突胶质细胞延迟性凋亡所引起的继发性脱髓鞘变化，则是SCI后损伤程度及范围进一步加重的原因。NF-κB活性表达的作用有其双面性—一方面通过介导炎性分子的转录起到了促进细胞坏死的作用；另一方面通过激活内源性途径起到抗凋亡功能。本实验中应用PDTC抑制NF-κB的结合活性，其结果是同时降低了NF-κB上述两方面的作用。但BBB评分却发现应用PDTC组（B组）大鼠的后肢功能行为学评分要低于SCI组（A组）的评分。也就是说，抑制了NF-κB活性表达所介导的细胞坏死作用，并没有提高大鼠后肢功能的BBB评分；而其抗凋亡功能的下降是评分低下的主要原因。这就说明了细胞凋亡在大鼠脊髓继发性损伤过程中起着重要的作用，其程度决定了大鼠后肢功能恢复状况。此外抑制脊髓神经细胞凋亡途径的实验研究，也证明了细胞凋亡在脊髓继发性损伤中的重要性，抑制神经细胞凋亡途径可显著改善大鼠后肢功能。目前有些学者认为NF-κB的活化表达起到促进细胞凋亡的作用。如Clemens等、Schneider等、Qin等的实验研究发