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目的通过观测慢性肾脏病1-4期肾虚证患者头发生长特性(密度、直径、白发率)、生物力学(抗拉强度、拉伸应变、应力-应变曲线)、氨基酸、微量元素、皮质醇、微观结构的改变,并与正常人头发的对比,用“护肾Ⅱ号”进行干预治疗,观测治疗前后患者头发的改变,为肾“其华在发”理论提供物质基础,扩大肾本质的研究范围。方法实验一:根据《素问·上古天真论》云:“女子七岁,肾气盛,齿更发长;……丈夫八岁,肾气实,发长齿更;……八八,天癸竭,精少,肾藏衰,形体皆极,则齿发去”的记载,将武汉市0-80岁160例汉族健康人,按照年龄段,分为A组(男~8岁组、女~7岁组)、B组(男~16岁组、女~14岁组)、C组(男~32岁组、女~28岁组)、D组(男~40岁组、女~35岁组)、E组(男~48岁组、女~42岁组)、F组(男~64岁组、女~49岁组)、G组(~70岁组)、H组(>70岁组),每组男女各10例。CBS-1800皮肤检测分析系统检测各组头发密度、头发直径、白发率随肾气变化的情况。招募武汉市汉族健康志愿者20例,纳入正常组。2013年3月-2015年3月湖北省中医院肾病科门诊慢性肾脏病1-4期(CKD1-4)肾虚证患者100例,按数字表法随机分为对照组和治疗组,各50例。健康组给予正常饮食;对照组给予低盐、低磷、优质低蛋白饮食、纠正肾性贫血、水电解质及酸碱失衡、改善微循环等常规处理;治疗组在对照组治疗的基础上加用“护肾Ⅱ号”口服,200ml/次,2次/天,疗程均为12个月。实验二:CBS-1800皮肤检测分析系统检测三组治疗前后头发生长特性(头发密度、头发直径、白发率)的改变;Instron5848 Micro Tester检测三组治疗前后头发生物力学(抗拉强度、拉伸应变、应力-应变曲线)的改变。实验三:柱前衍生-高效液相色谱检测三组治疗前后头发氨基酸含量的变化。实验四:电感耦合等离子体质谱(icp-ms)检测三组治疗前后头发微量元素含量的变化。实验五:纳米纤维固相萃取的高效液相色谱-荧光(hplc-flu)检测三组治疗前后头发皮质醇含量的改变。实验六:s-3000n扫描电子显微镜检测三组治疗前后头发皮微观结构的改变。结果(1)实验一结果显示,从出生到男子“四八”、女子“四七”之间,头发直径呈上升趋势,并且速率较快。男子在“五八”、女子在“五七”是头发直径最大。男子在“六八”、女子在“六七”后头发直径逐渐变小。男子女子从出生后毛囊密度基本保持不变,在男子在“六八”、女子在“六七”之后毛囊密度逐渐下降。出生后白发率男子在“六八”、女子在“六七”之后逐渐升高,男子上升速度远大于女子上升速度。(2)实验二结果显示,在头发密度、白发率方面,对照组、治疗组与正常组比较,有显著性差异(p<0.05);在头发直径方面,三组无显著性差异(p>0.05);在头发密度方面,对照组、治疗组治疗后与治疗前比较,有显著性差异(p<0.05),且治疗组治疗后与对照组治疗后比较,有显著性差异(p<0.05);在白发率方面,对照组治疗后与治疗前比较,无显著性差异(p>0.05),治疗组治疗后与治疗前比较,有显著性差异(p<0.05)。在抗拉强度、拉伸应变方面,对照组、治疗组与正常组比较,有显著性差异(p<0.05);在抗拉强度、拉伸应变方面,对照组治疗前、后比较,无显著性差异(p>0.05)。(3)实验三结果显示,对照组、治疗组14种氨基酸含量与正常组比较,均显著性下降,差异具有统计学意义(p<0.05);对照组和治疗组14种氨基酸含量治疗后与治疗前均显著性升高,差异具有统计学意义(p<0.05),且治疗组治疗后与对照组治疗后有显著性差异(p<0.05)。(4)实验四结果显示,对照组、治疗组cu元素含量与正常组比较,显著性升高,其他6种元素含量显著下降,差异具有统计学意义(p<0.05);治疗组、对照组治疗后cu元素含量较治疗前显著下降,其他6种元素含量显著升高,差异具有统计学意义(p<0.05),且治疗组治疗后与对照组治疗后有显著性差异(p<0.05)。(5)实验五结果显示,尿素氮与慢性肾脏病患者头发皮质醇含量相关系数r=0.655,p=0.00;血肌酐与慢性肾脏病患者头发皮质醇含量相关系数r=0.838,p=0.00;内生肌酐清除率与慢性肾脏病患者头发皮质醇含量相关系数r=-0.869,p=0.00。与正常组比较,对照组和治疗组皮质醇水平均显著性升高,差异具有统计学意义(p<0.05);与治疗前比较,对照组和治疗组治疗后皮质醇水平均显著性降低,差异具有统计学意义(p<0.05);治疗组治疗后与对照组治疗后比较,差异具有统计学意义(p<0.05)。(6)实验六结果显示,正常组患者毛小皮细胞呈屋瓦状重叠排列,厚薄一致,下缘被下部的毛小皮上缘覆盖,相互扣合紧密,呈趋于水平波浪状波纹,细胞表面光滑,未见翘起、破裂、孔洞、肿胀、纵沟及脱落等;慢性肾脏病患者,毛小皮排列层次疏密不均,大部分形状失去规则且厚薄不一,表面粗糙,游离缘不整齐,波纹的波峰、波谷起伏变化较大,纹理结构紊乱,间距不均,呈现出大、中、小锯齿间插排列,大多数毛小皮翻翘、破裂,可见缝隙,部分毛小皮间相互粘连并出现脱落,脱落处可见裸露的毛皮质;接受西医常规治疗的患者头发,毛小皮细胞排列不均,局部形状失去规则,基本上呈大锯齿状排列,纹理结构较紊乱,部分毛小皮脱落,可见裸露的毛皮质,部分毛干表面凹凸不平;接受“护肾Ⅱ号”治疗的患者,毛小皮的排列层次欠均匀,呈小波浪状波形,峰间距较小,基本上呈小锯齿状排列,少数可见裸露的毛皮质。结论(1)健康者头发直径、密度、白发率随肾气的变化而改变,且改变趋势与《黄帝内经》关于肾气的描述基本吻合。(2)CKD1-4期肾虚证患者头发密度降低、白发率升高,头发直径无明显改变,头发的脆性增加、韧性降低;“护肾Ⅱ号”能显著增加CKD1-4期肾虚证患者的头发密度、降低患者白发率,能显著增加CKD1-4肾虚证患者头发韧性,降低脆性。(3)CKD1-4期肾虚证患者头发14种氨基酸含量显著降低,“护肾Ⅱ号”能显著增加CKD1-4期患者头发氨基酸含量。(4)CKD1-4期肾虚证患者头发Cu元素含量显著升高,Mg、Ca、Fe、Zn、Se、Sn6种微量元素含量显著降低,“护肾Ⅱ号”能显著降低CKD1-4期患者头发Cu元素含量,显著增加Mg、Ca、Fe、Zn、Se、Sn 6种微量元素含量。(5)CKD1-4期肾虚证患者头发皮质醇含量与尿素氮、血肌酐呈正相关,与内生肌酐清除率呈负相关,头发皮质醇含量可以作为慢性肾脏病预测的指标之一;“护肾Ⅱ号”能显著降低CKD1-4期患者头发皮质醇水平。(6)CKD1-4期肾虚证患者头发微观结构明显发生改变,“护肾Ⅱ号”能显著改善CKD1-4期患者头发微观结构。(7)通过上述6点,我们认为从头发生长特性、生物力学、氨基酸、微量元素、皮质醇、微观结构方面,为肾“其华在发”理论提供了物质基础,扩大了肾本质的研究范围。