γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶、转化生长因子β1在吸烟大鼠肺组织中表达的研究

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目的:观察不同吸烟时间大鼠支气管上皮细胞、肺泡巨噬细胞和肺组织中γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)和转化生长因子β1(TGFβ1)mRNA及其蛋白的表达水平以及二者的相关性,探讨 TGFβ1在吸烟所致慢性阻塞性肺疾病(COPD)氧化/抗氧化失衡中的作用。 方法:自制大鼠实验性被动吸烟装置,建立吸烟引起慢性阻塞性肺疾病的动物模型,将 40 只大鼠随机分为不吸烟组、吸烟 1 月组、吸烟 2 月组、吸烟 3 月组,每组各 10 只。采用免疫组化法半定量检测支气管上皮细胞及肺泡巨噬细胞中γ-GCSh(重链亚单位)和 TGFβ1蛋白表达的影响。原位杂交半定量技术检测支气管上皮细胞γ-GCSh 和 TGFβ1 mRNA 的表达。逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法检测肺组织匀浆中γ-GCSh 和 TGFβ1 mRNA的表达。 结果:吸烟 3 月组大鼠出现了肺气肿的病理改变。(1)大鼠支气管上皮细胞γ-GCSh 和 TGFβ1蛋白表达水平,吸烟 1 月组(0.275±0.051、0.459±0.043 )、吸烟 2 月组(0.497±0.067、0.559±0.051)和吸烟 3 月组(0.847±0.088、0.787±0.071)明显高于不吸烟组(0.186±0.025、0.195±0.029),差异有统计学意义(P 均<0.01);(2)大鼠支气管上皮细胞γ-GCSh和 TGFβ1 mRNA 表达水平,吸烟 1 月组(0.530±0.049、0.494±0.067)、吸烟 2 月组(0.786±0.065、0.792±0.065)和吸烟 3 月组(1.187±0.198、1.099±0.147)明显高于不吸烟组(0.273±0.056、0.240±0.057),差异有统计学意义(P 均<0.01);(3)大鼠肺泡巨噬细胞γ-GCSh、TGFβ1蛋白表达水平,吸烟 1 月组(23.94%±3.016%、20.72%±2.214%)、吸烟 2 月组(33.97%±2.943%、31.76%±3.734%)和吸烟 3 月组(55.82%±4.872%、44.74%±4.861%)明显高于不吸烟组(15.28%±1.817%、13.76%±2.753%),差异有统计学意义(P 均<0.01); (4)大鼠肺组织匀浆中γ-GCSh 和 TGFβ1 mRNA 表达水平,吸烟 1 月组(0.749±0.120、0.695±0.112)、吸烟 2
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