高渗透压对兔眼表上皮和黏蛋白MUC 5AC表达影响的实验研究

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目的:研究高渗透压对兔眼表上皮和黏蛋白MUC5AC表达的影响。方法:12只健康新西兰大白兔随机分为3组,其中两组分别用等渗的生理盐水(308mOsM)和高渗的氯化钠溶液(500 mOsM)点双眼,一天六次,每次两滴,空白对照组不予任何处理。于实验的第0、7、14天测定泪液分泌量及泪膜破裂时间,并通过结膜印迹细胞学检查测定杯状细胞密度。于实验第14天处死动物,用光镜,扫描和透射电镜观察角、结膜组织病理改变,并通过Western blot方法检测结膜组织MUC5AC的表达水平。结果:经高渗盐水处理后,实验第7天和14天,泪膜破裂时间较正常对照和生理盐水组均显著缩短(P值均<0.01),但泪液分泌量无明显改变(P值均>0.05)。高渗盐水滴眼7天后,结膜杯状细胞密度较其它两组明显下降(P值<0.05),结膜上皮细胞鳞状化生。而生理盐水组与正常对照组相比,上述各指标无统计学差异。高渗盐水滴眼14天,HE染色光镜观察发现,结膜上皮下炎症细胞浸润,角膜上皮部分角化脱落;扫描电镜显示角膜上皮明显肿胀、脱屑、微绒毛减少;透射电镜则显示浅层角膜上皮细胞间连接松弛,靠近基底层的上皮细胞内自噬空泡增多;结膜组织Western blot检测发现黏蛋白MUC5AC表达水平明显下降。而正常对照和生理盐水组未发现明显组织病理学改变。结论:高渗压力可引起结膜杯状细胞密度下降及黏蛋白MUC5AC表达水平降低,并破坏结膜和角膜上皮,最终导致泪膜稳定性下降。
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