利用AFLP分子标记和无毒基因构建小麦白粉菌遗传连锁图谱

来源 :中国农业科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:YAOXUEQIN
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小麦是我国第二大粮食作物,而由小麦白粉菌引起的病害使小麦的产量及品质受到严重的影响,因此我们对其病原菌小麦白粉菌进行研究,为寻找适合的防治措施提供理论基础。目前国内对小麦白粉菌的遗传学研究还很薄弱,在国际上也尚未获得小麦白粉菌无毒基因克隆的报道。在国内,虽然李志英(2004)、梅丽宏(2006)分别构建了一个小麦白粉菌的遗传图谱,但已构建的图谱在饱和度和与功能基因连锁的分子标记方面均有待于改进。国外目前也还未有小麦白粉菌遗传连锁图谱的报道。由于对布氏禾白粉菌的研究还很有限,到目前为止布氏禾白粉菌的染色体数目也还没有定论。小麦白粉菌遗传连锁图谱的构建,不仅对该病原菌的基因组及遗传研究具有重要意义,而且为其他功能基因的定位及克隆奠定了基础。本研究以具有8个无毒基因差异的小麦白粉菌亲本菌株E17和CPW-1及其经杂交获得的F1代97个后代菌株作为实验群体即HAP群体,利用AFLP分子标记方法,对两小麦白粉菌亲本及其后代群体进行多态性分析,符合1∶1分离比的AFLP标记采用MAPMAKER/EXP (VERSION 3.0)软件并利用Joinmap4.0软件进行比较作图,最后结合MapDraw V2.1软件绘制小麦白粉菌的遗传连锁图谱。实验选用102对AFLP引物组合对亲本菌株进行多态性分析,有61对引物产生多态性。这61对引物在后代群体中共产生138个多态性标记位点,与6个通过毒性鉴定获得的无毒基因数据共144个进行分析。利用Mapmaker分析,结果绘制小麦白粉菌连锁群10个,共包含117个标记位点,其中包括5个无毒基因位点和112个AFLP标记位点,图谱总长1425.1 cM,标记间平均距离为12.2 cM。5个无毒基因分别被标记到3个连锁群中,其中2个无毒基因Avr4b、Avr4a紧密连锁,距P11M23.3为4.2 cM、距P18M15.1为4.5 cM,并定位在Bgt1中;Avr13位于P22M18.1和P13M17之间,遗传距离分别为0.6 cM和0.1 cM,定位于Bgt1;Avr3c位于Bgt2,距离标记P20M11为3.0 cM;Avr3f被定位在Bgt8中。本实验所构建的遗传连锁图谱为首个在小麦白粉菌中构建的具有117个位点的遗传图谱,而且首次获得了与无毒基因紧密连锁的AFLP分子标记位点。这些为小麦白粉菌无毒基因的克隆、无毒基因的功能和遗传学研究提供了基础。
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