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对从南海海洋沉积物中分离纯化出的130株海洋放线菌进行发酵和活性筛选,通过采用抑菌圈抗菌模型和卤虫致死模型筛选,最终筛选出7株活性较高的菌株。卤虫致死模型是将粗浸膏的DMSO溶液加入到有卤虫的海水中,依照其24h致死的卤虫数量来确定其细胞毒活性的强弱;抗菌模型主要是采用粗浸膏的DMSO溶液对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis)、金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)和大肠杆菌(Escherichiacoli)的抑制作用,依照抑菌圈的大小来确定粗提物的抑菌程度。
对一株抗菌活性及卤虫毒性较强的放线菌菌株LR32进行了16S分子生物学方法鉴定,该菌株为链霉菌Streptomyces lusitanus SCSIO LR32。采用四种培养基对SCSIO LR32的发酵条件进行了优化,经检测后选定JNP1A和改良RA为最优培养基方案,并进行放大培养发酵,对其次级代谢产物进行了研究。采用硅胶柱色谱和半制备反相高效液相色谱分离方法,从其JNP1发酵产物中分离得到4个酰胺类化合物,经MS、1H和13C NMR波谱分析鉴定为甲苯2,4-二氨基甲酸甲酯(1),甲苯2,4-二氨基甲酸乙酯(2),甲苯2,6-二氨基甲酸甲酯(3),甲苯2,6-二氨基甲酸乙酯(4);运用X-单晶衍射确定了(1)的结构式;其中化合物2和4是首次从自然界中分离得到;从改良RA培养基发酵产物中分离获得了6个聚酮类化合物(5~10),其中化合物(5~9)为新化合物,化合物10为已知化合物grincamycin。