牛血清白蛋白和阿特拉津在金纳米通道内迁移特性研究

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纳米通道是指具有0.1~100 nm的孔或管道结构(nanopore, nanochannel, nanotube或nanotubule),纳米通道除具有独特的微观管状结构外,还表现出与宏观物质不同的某些特殊性质,如力学、化学、电学和光学性质等。纳米通道作为生物纳米技术研究的一个重要分支,在生物物质、有机小分子、手性物质等化合物的分离中扮演了重要角色。通过对纳米通道的化学修饰可显著地改变纳米通道的特性,极大的促进目标物质的有效分离和检测。阿特拉津(ATR)是一种广泛使用的除草剂,对大部分一年生双子叶杂草具有很好的防治作用。由于阿特拉津容易渗入到土壤和地下水,大规模使用这种农药造成饮用水和土壤的严重污染。ATR属于环境内分泌干扰物,长期接触ATR会导致乳腺癌和卵巢癌的发生,影响人体的内分泌系统以及动物的生殖繁衍。一些常用的分析法,如薄层色谱法,气相色谱,高效液相色谱法,气质联用,被广泛用于痕量农药检测。尽管这些方法具有很好的灵敏度,但它们复杂、费时,且仪器不易携带,在连续监测及现场测定中受到限制。牛血清白蛋白(BSA)已广泛应用于各种除草剂免疫原的制备中。本论文以金纳米通道膜为载体,研究以牛血清白蛋白制备的阿特拉津免疫原及牛血清白蛋白在金纳米通道内的迁移特性。研究内容主要包括以下几个部分:(1)以聚碳酸酯膜为基底,采用化学沉积法,通过实验条件的摸索,成功制备金纳米通道膜。(2)制备阿特拉津免疫原,当阿特拉津免疫原及阿特拉津分别加入含有抗体的进样池时,分别产生阿特拉津免疫原/抗体、阿特拉津/抗体复合体,它们较单独的抗体在体积上要大,对电解质通过氯离子修饰的金纳米通道引起的电流产生阻碍作用,出现电流衰减。而其他除草剂加入时不会与抗体结合,没有电流衰减产生,借此实现了阿特拉津选择性测定。(3)对金纳米通道进行氯离子修饰,考察BSA迁移通过金纳米通道时引起的电流响应。在电场作用下电解质离子通过纳米通道时产生稳定的电流,当牛血清白蛋白加入含BSA抗体的进样池后,与溶液中的牛血清白蛋白抗体分子形成BSA/抗体复合体,该大体积的复合体对电流产生一定的阻碍作用,引起相应的电流降,基于此发展纳米通道检测BSA的传感技术。(4)以BSA为考察对象,研究蛋白质在金纳米通道膜上的吸附。考察了pH、温度、时间、金纳米通道孔径及修饰剂对BSA的吸附量的影响。
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