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目的:通过鉴定Rock2磷酸化位点来研究其对肝癌细胞生物学活性的影响,并明确Rock2在肝癌发生发展过程中的作用。方法:1.通过磷酸化位点预测软件以及生物信息学分析Rock2结构,并设计可能发生磷酸化位点的磷酸化多肽。2.分别对HepG2细胞和MHCC97H细胞进行UV照射,通过Western Blot分析Rock2可能发生磷酸化的位点。3.应用平板克隆形成实验和细胞凋亡实验,观察UV辐射诱导DNA损伤时,Rock2磷酸化位点对肝癌细胞生物学活性的影响。结果:1. Rock2可能发生磷酸化的位点有:(1) S442;(2) S771;(3) T814。2. UV照射后,Rock2的T814位点发生磷酸化。3. UV照射后,MT-Rock2组的克隆形成率比WT-Rock2组低。4. UV照射后,MT-Rock2组的细胞凋亡率比WT-Rock2组高。结论:1. UV辐射诱导DNA损伤时,Rock2的T814位点发生磷酸化。2. Rock2的T814位点磷酸化对UV造成的DNA损伤具有修复作用。