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背景与目的大肠癌是非常常见的消化道恶性肿瘤之一。随着人们生活习惯的不断改变,近年来我国大肠癌的发病率呈现上升趋势,目前最有效的治疗手段仍是尽可能的手术切除。但大肠癌早期多无症状,随着疾病的进展,一旦出现症状,病情往往已经非常严重,甚至到了晚期。原发肿瘤已被切除的患者也有多数死于局部复发或远处转移。大肠癌的存活率与淋巴结和远处转移有着密切的联系,然而转移形成的机制尚不十分明确。尽管大肠癌的综合治疗效果在近些年已经取得了很大的改善,但是已有转移患者的治疗前景仍不容乐观,早期诊断和转移风险的预计对大肠癌患者预后的改善是非常关键的。因此,寻找有意义的标志大肠癌演进和预后的病理学指标成为我们当前的首要任务。随着科学技术的发展,人们越来越多的认识到大肠癌的发生是涉及到多种基因的异常改变、多个阶段、多步骤的复杂过程。人类DOC2属于Disabled基因家族,所以又称为Dab2。DOC2/Dab2的结构提示,它是一种可能的信号分子,不仅参与调控正常细胞的生长、分化,而且还具有肿瘤抑制功能。但DOC2/Dab2的具体作用机制尚不完全清楚,因此其作为抑癌基因尚未形成定论,有待进—步深入研究。癌基因是近年来人们研究的热点。Ras基因是目前研究较受瞩目的癌基因,该基因的激活与多种肿瘤密切相关。其中与大肠癌的发生、发展关系最为密切的是rasP21,它不仅通过异常的信号转导过程来参与细胞的恶性转化,还在恶性肿瘤新生血管生成方面起着重要的作用。因此,Ras及其相关的信号转导途径在大肠癌发生、发展过程中的作用值得进一步研究。C-Fos是一类核分裂信号效应蛋白,对细胞的增殖、生长具有重要的调控作用,同时还对多种基因的转录进行调节。C-Fos的表达和调控与多种疾病的发生、发展关系密切。本实验旨在研究DOC2/Dab2、rasP21和c-Fos蛋白在大肠癌发生、发展过程中的变化及其与大肠癌各临床病理参数之间的关系,从而为寻找有意义的临床病理学指标及开发新的肿瘤靶点治疗提供新思路。材料与方法1、收集大肠癌组织110例,大肠腺瘤组织29例,正常大肠黏膜组织40例。所有患者均为初治,术前未行放、化疗或其他针对肿瘤的生物靶向治疗。2、免疫组织化学方法检测DOC2/Dab2、rasP21及c-Fos蛋白的表达情况。并分析三指标间的相关性及其分别与大肠癌临床病理参数之间的关系,探讨其在大肠癌中的相互作用。3、统计学处理：采用SPSS13.0软件对所有实验数据进行统计学分析。同一指标在不同临床病理特征间的比较采用卡方检验或Fisher s精确概率法,采用Spearman等级相关分析大肠癌组织中DOC2/Dab2、rasP21和c-Fos表达的相互关系。检验水准a=0.05。结果1、DOC2/Dab2蛋白在大肠组织中的表达情况：免疫组化结果显示DOC2/Dab2蛋白的阳性着色定位于胞浆中。DOC2/Dab2蛋白在大肠正常黏膜、腺瘤及大肠癌组织中的阳性表达率分别为82.50%(33／40)、55.17%(16／29)和30.91%(34／110),三组之间差异有统计学意义(P<0.05),两两比较亦均有显著性差异(P<0.017)；DOC2/Dab2在大肠癌组织中的表达与患者年龄、性别、组织学类型、分化程度、浸润深度、临床分期的相关性无统计学意义(P>0.05),而与淋巴结及肝转移的相关性有统计学意义(P<0.05)。2、RasP21蛋白在大肠组织中的表达情况：免疫组化结果显示rasP21蛋白的阳性着色主要定位于细胞膜内侧或细胞浆中。RasP21蛋白在大肠正常黏膜、腺瘤及大肠癌组织中的阳性表达率分别为7.50%(3／40)、58.62%(17／29)和68.18%(75／110),三组之间差异有统计学意义(P<0.05),其在大肠癌及腺瘤组织中的表达明显高于大肠正常粘膜组织(P<0.05),但前两者之间无显著性差异(P>0.05)；RasP21蛋白在大肠癌组织中的表达与患者年龄、性别、组织学类型、浸润深度、临床分期的相关性无统计学意义(P>0.05),但与分化程度、淋巴结及肝转移的相关性有统计学意义(P<0.05)。3、C-Fos蛋白在大肠组织中的表达情况：免疫组化结果显示c-Fos蛋白阳性着色主要定位于胞核或细胞浆中。c-Fos蛋白在大肠正常黏膜、腺瘤及大肠癌组织中的阳性表达率分别为12.50%(5／40)、37.93%(11／29)和55.45%(61／110),三组之间差异有统计学意义(P<0.05),其在大肠癌及腺瘤组织中的表达明显高于大肠正常粘膜组织(P<0.05),但前两者之间无显著性差异(P>0.05)；而c-Fos蛋白的表达与患者年龄、性别、组织学类型、浸润深度、临床分期、淋巴结及肝转移的相关性无统计学意义(P>0.05),但与分化程度的相关性有统计学意义(P<0.05)。4、DOC2/Dab2与rasP21蛋白在大肠癌组织中的表达呈负相关关系(P<0.01)。5、DOC2/Dab2与c-Fos蛋白在大肠癌组织中的表达呈负相关关系(P<0.01)。6、RasP21与c-Fos蛋白在大肠癌组织中的表达呈正相关关系(P<0.01)。结论1. DOC2/Dab2在大肠正常黏膜、腺瘤及大肠癌组织中的表达逐渐降低,其在大肠癌中的表达与淋巴结及肝转移密切相关,提示DOC2/Dab2表达水平的下调是大肠癌发生过程中的早期事件,可能促进了大肠癌细胞的转移。2. RasP21蛋白在大肠癌及腺瘤组织中的表达明显高于大肠正常粘膜组织,其在大肠癌中的表达与分化程度、淋巴结及肝转移密切相关,提示rasP21蛋白的异常高表达与大肠癌的发生、发展有关,可能促进了大肠癌细胞的浸润和转移。3. C-Fos蛋白在大肠癌及腺瘤组织中的表达明显高于大肠正常粘膜组织,其表达与分化程度的相关性有统计学意义,提示c-Fos蛋白的高表达可能是大肠癌发生、发展过程中一个较早的分子变化。4.大肠癌中DOC2/Dab2蛋白与rasP21、c-Fos蛋白的表达均呈负相关的关系,提示DOC2/Dab2可能通过与rasP21及c-Fos蛋白相反的作用机制来参与大肠癌的发生、发展及浸润、转移的过程。5.大肠癌中rasP21与c-Fos蛋白的表达呈正相关关系,提示二者的高表达可能具有协同作用,共同参与了大肠癌发生、发展的过程。