丝素--天冬酰胺酶生物结合物的合成及其特性

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目的 针对抗癌药物<,L>-天冬酰胺酶制剂临床应用中常见机体内半衰期短、易发生免疫过敏反应产生严重副作用等问题,探讨天然丝素蛋白对<,L>-天冬酰胺酶的修饰效果.方法 以水溶性丝素为修饰剂,戊二醛为交联剂,制备丝素-<,L>-天冬酰胺酶生物结合物(即修饰酶).对修饰酶进行动力学性能分析及动物体内免疫性试验等.结果 修饰酶活力回收率相对较高,达76.05﹪,pH值、温度、胰蛋白酶水解、贮存条件等不同情况下稳定性增强,血清中半衰期(近70h)也较自然酶(30h)显著延长;修饰酶免疫原性明显降低,抗血清效价为2<1>,显著低于自然酶(2<4>),抗原-抗体结合能力也明显减弱;自然酶表观米氏常数Km=4.765×10<-3>mol·L<-1>,为修饰酶(Km(app)=0.844×10<-3>mol·L<-1>,为修饰酶(Km(app)=0.844×10<-3>mol·L<-1>的5.6倍,表明修饰后酶对底物的亲和性提高.结论 初步证实丝素-<,L>-天冬酰胺酶生物结合物能较好地克服自然酶制剂常见的缺点,提示有作为新型抗癌药物进一步研究和开发的价值.
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