【摘 要】
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目的:动态观察应用疏肝健脾活血方含药血清对HSC-SEC共培养下HSC活力、SEC失窗孔及Notch通路的影响,探讨疏肝健脾活血方抗肝纤维化的作用机制。方法:制备疏肝健脾活血方含药
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目的:动态观察应用疏肝健脾活血方含药血清对HSC-SEC共培养下HSC活力、SEC失窗孔及Notch通路的影响,探讨疏肝健脾活血方抗肝纤维化的作用机制。方法:制备疏肝健脾活血方含药血清;建立肝纤维化大鼠模型,观察肝组织病理形态变化,采用胶原酶灌注、Percoll不连续密度梯度离心法分离正常大鼠HSC、SEC及肝纤维化大鼠SEC。以Notch通路激活剂rh NF-κB、阻断剂DAPT及疏肝健脾活血方含药血清作用于HSC-SEC共培养体系,MTT法检测HSC活力,Western Blot法检测SEC中CD31、v WF及HSC中ColⅣ、Notch 1、Jagged 1、Hes 1蛋白表达量,RTq PCR法检测HSC中Notch 1、Jagged 1、Hes 1 m RNA表达情况。结果:与正常组比,模型组HSC活力上升(P<0.05,P<0.01);与模型组比,NF组HSC活力及Jagged 1m RNA表达量上升(P<0.05,P<0.01),DAPT组HSC活力,CD31、ColⅣ、Notch 1、Jagged 1蛋白及Notch 1、Jagged 1、Hes 1 m RNA表达量均下降(P<0.05,P<0.01),中药组HSC活力及Jagged 1m RNA表达量均下降(P<0.05,P<0.01);与DAPT组比,中药加DAPT组HSC活力及CD31、v WF、ColⅣ、Notch 1、Jagged 1蛋白表达量均下降(P<0.05,P<0.01);与NF组比,中药加NF组HSC活力,CD31、v WF、Notch 1、Hes 1蛋白及Notch 1、Jagged 1m RNA表达量均下降(P<0.05,P<0.01)。结论:疏肝健脾活血方抗肝纤维化作用机制可能与抑制HSC活化,抑制SEC失窗孔及阻断Notch通路有关。
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