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前列腺癌是一个以老年人为主的疾病。其发病率随着年龄的增长而增加,有75﹪新诊断的前列腺癌病例为65以上的男性。目前在临床上应用血清学、超声波和直肠指诊来进行前列腺癌的诊断,但这些方法在特异性和灵敏度方面还存在很大的局限性,这就影响到前列腺癌的诊断、治疗和预后。随着分子生物学、免疫学等学科相关技术的介入,PCa的肿瘤标记物逐步受到重视。当前临床诊断中使用血清前列腺特异性抗原(prostate specific antigen,PSA/KLK3)作为前列腺癌和前列腺增生的主要鉴别诊断手段。然而由于PSA对。PCa并不是特异的,血清PSA浓度升高并非总是提示PCa。当PSA水平轻度升高,在4~10 n咖l之间时,还难以判断是BPH还是PCa。因此,本研究是为临床诊断寻找比PSA更可靠的诊断指标。
前列腺癌的发生是一个多基因渐变失衡的复杂过程,凭单一指标的检测无法准确判断。近期,人们发现多个基因表达的变化与前列腺癌病程相关,如能结合临床病理学研究,未来可作为前列腺癌病程的生物标记,对前列腺癌进行早期诊断和分型。本论文利用国内外前列腺癌和前列腺增生相关基因研究成果,经充分的文献调研,预选了12个基因(trmp-2、RPSl6、TMPRSS2、KLK11、Ki-67、PCNA、HER2/ERBB2、MYC、NFKBIA、SREBF2、PSMA/FOLH1、GSTP1)作为研究对象,通过荧光定量PCR技术,结合前列腺癌细胞株(LNCaP和PC-3)、前列腺癌和前列腺增生临床样本,对样本中12个基因的表达进行检测。研究中设计了12个基因和1个内参基因β-actin的引物,PCR扩增制备各基中山火学硕上学位论文彭瑾瑜前列腺癌与前列腺增生诊断基因组合的研究因探针序列后成功克隆到质粒载体中;运用包含这13个基因的荧光定量PCR技术对细胞株和临床样本进行检测。检测结果证明,这12个基因组合能明显区分PCa和BPH,其中TMPRSS2/KLK11、Ki-67/PCNA、NFKBIA/SREBF2可作为检测基因的核心组合。HER2/MYC基因组合虽然没有前列腺癌的特异性,但是HER2/MYC的高表达可能有助于前列腺癌的早期诊断。